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- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
小鼠原代细胞
- 细胞类型:
详询
- 肿瘤类型:
详询
- 供应商:
厦门逸漠生物科技有限公司
- 库存:
999
- 英文名:
无
- 生长状态:
正常
- 年限:
原代
- 运输方式:
复苏发货或干冰发货(顺丰快递)
- 器官来源:
详询
- 是否是肿瘤细胞:
详询
- 细胞形态:
球形
- 免疫类型:
详询
- 物种来源:
小鼠
- 相关疾病:
详询
- 组织来源:
外周血
- 规格:
5*10^5
产品基本信息
细胞名称:小鼠红细胞
种属来源:小鼠
组织来源:外周血
细胞形态:球形
培养基:: 专用培养基
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代方法:1:2至1:3,每周2- 3次
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
支原体检测:无
细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有1 mL小鼠红细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有小鼠红细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将小鼠红细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查小鼠红细胞密度。
2)细胞传代:如果小鼠红细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培养瓶中(T25瓶1-2ml,T75瓶2-3ml),使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加3-4ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将小鼠红细胞悬液按1:2比例分到新的含6-8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3)细胞冻存:待小鼠红细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使小鼠红细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。





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