Anti-Mouse CD3 PE (100 μg)

用 CD3/CD28 做好 T 细胞激活与扩增

分别利用 CD3 与 CD28 的功能学抗体，以及 CD3/CD28 Streptamer® 激活扩增 T 细胞的实验步骤与实验结果。 CD3/CD28抗体法 1、实验步骤： 1.1 抗体包被 用无菌 PBS 将 anti-mouse CD3 抗体（克隆号：145-2C11）稀释至 5μg/ml，稀释后的抗体加入到 24 孔板中，每孔 400μl，4°C 包被过夜。（注：板子在加入抗体之前，先用无菌 PBS 润洗 2-3 遍，避免干孔）； 1.2 小鼠脾脏淋巴细胞分离（次日） 1. 将 70μm

用全血直接分选 CD3+ T 细胞

- 3) 及 CD45 -PE (HI30，白细胞标志) 抗体染色后，进行流式分析，死细胞以 DAPI 染色先行排除，左右分别为分选前后的细胞群分布。   总结： 几次实验的结果，使用 Fab-TACS® Gravity column 来从全血直接进行 CD3+ T 细胞分选，平均得率为 84.5%，纯度大于 90%，细胞存活率高于 95%，且目标细胞不含标记，贴近天然，使下游实验更精确。

[实验步骤] 由全血直接分选 CD3+ T 细胞

: 由此步骤开始，流出的溶液包含目标细胞，请使用新的试剂管收集！首先，加入 1 ml 的 biotin 洗脱液，孵育 2 min。其次，加入 10 ml biotin 洗脱液，洗脱目标细胞。d) 再加入 10 ml biotin 洗脱液，洗下剩余的目标细胞。最后两步骤所收集的液体含分选出的目标细胞。(4) 结果分析以下流式图为从 7.5 ml 全血中，选出 CD3+ T 细胞的数据。选后细胞以 CD3-APC（OKT-3） 及 CD45-PE（HI30，白细胞标志） 抗体染色后，进行流式分析，死细胞