LentiCRISPR v2-DSG2-sgRNA1-PUR

AAV 在眼科中的应用

2 作为递送载体。派真生物能为您提供从研究至 GMP 级别的多种 AAV 血清型载体，助力眼科疾病基因治疗。     AAV 眼科基因治疗策略 1、基因替代（Gene Replacement）： 原理：将功能正常的目的基因的 CDS 序列由 AAV 转导到细胞内，并在载体上启动子的作用下转录表达 应用场景：隐性单基因疾病 应用案例精选 适应症：双等位基因 RPE65 突变相关视网膜营养不良  病毒载体：AAV2-hRPE65v2  注射方式：视网膜下注射，1.5×10^11 vg/ 眼，0.3 ml

稳定细胞株药筛一般用什么抗生素？

性维持 → 确定工作浓度 快速版： 载体带 Puro 抗性 → puromycin，多数细胞 1~10 μg/ml 载体带 Neo 抗性 → G418，浓度范围更大，筛选周期更长 载体带 Bsd 抗性 → blasticidin，起效快、用量低 双载体系统（如 Cas9 + sgRNA）→ 两种抗生素同时维持，各取筛选浓度的 1/2~1/4 或更低 --- 一、三种常用抗生素对比   Puromycin（嘌呤霉素） Neomycin/G418 Blasticidin（杀

国自然/高分文章利器！CRISPR文库筛选保姆级指南：从Cas9递送到表型选择一文打通！

研究人员将靶向不同基因的众多sgRNA混合构建成“sgRNA文库”，从而实现高通量遗传筛选。在实验操作中，需严格控制感染条件，确保每个细胞仅整合一条sgRNA。在此条件下，整个细胞群体便构建为一个高度复杂的基因扰动细胞池（Perturbed cell pool），其中每个细胞均携带靶向特定基因的sgRNA并发生相应的基因组编辑事件。随后，对该细胞群体施加特定的选择压力或进行表型分选。最后，通过高通量测序对比筛选前后sgRNA的丰度变化，那些发生显著富集或耗竭的sgRNA，即可精准指向驱动目标表型