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文献和实验含还原剂(如Na2 S2 O5 等)量多时,会抵消氯胺T的作用,降低碘利用率,甚至导致标记完全失败。放射性碘源要用无载体的,标记所用全部用具和试剂必须不含碘;只要有极少量的碘的污染,非放射性碘就会稀释放射性碘,使放射性碘利用率显著降低。为了便于放射性防护和除污染,以及减少射线对蛋白质分子的损伤,标记投入的放射碘量不宜过大,一般以 (2)放射性碘与多肽、蛋白质用量的比例:这比例对标记结果的影响很大。如上述原因,一般标记时放射性投入量不宜过多,示踪实验室中常规每次只用1~2mCi
蛋白质、多肽的放射性核素(125I)的标记氯胺T法(ch-T法)
,新鲜配制,即配即用。 (3)偏重亚硫酸钠溶液:用0.05mol/L pH7.4 PB配制成2mg/ml,新鲜配制。 (4)KI溶液:用0.05mol/L pH7.4 PB配制成2mg/ml。 (5)待标记的蛋白质或多肽:用0.05mol/L pH7.4 PB配制成1mg/ml。 (6)Na125 I溶液(3.7GBq/ml) (7)分离柱和Sephadex G50凝胶 (8)0.05mol/LpH7.4 磷酸盐缓冲液(PBS) (9)放射性薄层扫描仪和活度
Nature 重磅:肿瘤微生物来源的多肽可作为免疫治疗的新靶点
细菌样本中发现了将近 300 种多肽。在同一个人的不同肿瘤中和不同人的肿瘤中发现了一些多肽的存在。图片来源:Nature为了验证细菌肽是否真的由黑色素瘤细胞呈现,而不是被抗原呈递细胞 (APCs) 的免疫细胞检测、吸收并将病原体呈现给免疫系统的其他细胞。研究人员使用一种免疫细胞标记蛋白来区分两个黑色素瘤样本中的细胞为 APCs 和肿瘤细胞。免疫肽组学结果显示,两组细胞均含有细菌肽,也都可以呈递一些细菌肽。表明同一肽既可以通过 APCs 呈递来启动免疫反应,也可以成为免疫系统攻击肿瘤细胞的靶点
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