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- 2025年07月13日
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文献和实验liteng1117 求助: 构建好了重组腺病毒进行蛋白表达，分子量是14kd，5%的浓缩胶70v，12%，或15%的分离胶110v，跑90min。湿转：100v，90min。封闭用5%的脱脂奶粉，封闭3h（因为背景深，以为封闭久会好些）。一抗1:3000，4度过夜，二抗1:5000，孵育1h，洗膜都是用TBST漂洗15min ×4次。但是显影后背景特别深，虽然可以看见目的条带，但还是有一些非特异性的条带出现，不知道是封闭出问题还是一抗浓度过高。
【求助】180KD的膜蛋白western转膜条件怎样？（湿转）
zhywang4072 鄙人现在做一180KD的蛋白，之前转PVDF膜用的是100v两个半小时，预染marker转得很漂亮，内参也很不错，但是目标蛋白条带却没有，请教各位大侠，这是什么原因？还有诸位大蛋白转膜时候条件怎样？我用的是湿转，谢谢 wodezxn 我觉得100V2h肯定是足够了，没转上应该是你目的蛋白的问题，可能是蛋白表达量太少或者你提蛋白的时间有问题。 zhibinx2007
，与同事领导往来都是不可避免的。大部分博士，都是未参加过工作的本科生或者硕士生，一起共事相比较社会上还是少了很多套路，所谓的上下级关系其实还是师生关系，跟「同事」们还能够保持学生时代的友谊。另外，在高校院所很容易与比自己能力强的人共事，与大佬为伍，才能进步，想想与两院院士偶遇食堂，互相探讨学术，岂不是能吹上一年！这波不亏！图片来源：全景网然而，在读博士期间发现一个现象，大家都 30 来岁了，说起话来还和小孩子一样，保持着学生时代的「纯真」，这就是没有经历社会磨练的结果。如果你想学习职场中的套路，快速
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