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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 物种来源:
大鼠
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:
细胞名称:大鼠小肠Cajal间质细胞
商品货号:YS-01X7569
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项:


1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。

公司正在出售的产品:

| C57BL/6小鼠T细胞淋巴瘤细胞 | 层粘蛋白α1封闭多肽 |
| 人肾上腺皮质腺癌细胞 | MACROD1蛋白封闭多肽 |
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| 大鼠甲状腺细胞 | 原癌基因蛋白/活化蛋白1封闭多肽 |
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| 人黑色素瘤细胞 | 羧肽酶抑制剂封闭多肽 |
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文献和实验冰冻切片免疫组织化学染色 1.新鲜组织或在-80℃保存的组织用恒冷箱冰冻切片机切片,厚度为10~40gm; 2.将切片裱于载玻片上,立即用电吹风吹干或室温放置30分钟,如不能及时染色,密封后一20℃保存; 3.染色前组织切片用冷丙酮4℃固定10―20分钟,PBS洗2次,每次5分钟; 4。必要时应用0.1%枸橼酸钠与0.1%Triton X―100的混合液将细胞膜打孔。 其余步骤同石蜡切片。SABC法染色,DAB显色大鼠小肠腺细胞核呈棕色为BrdU免疫
内保存。2)染色程序:①新鲜组织恒冷箱切片(可用10%福尔马林固定10分钟,或不固定);②人孵育液,37C~孵育10分钟(肾)至 60分钟(肝);③流水冲洗;分钟;④人2%硝酸钴溶液2分钟;⑤蒸馏水浸洗;⑥人1%硫化铵溶液内1分钟;⑦蒸馏水洗;⑧甘油明胶封固。3)结果与评价:酶活性部位显示棕黑色为硫化钴沉淀。该法的反应产物可发生扩散,定位欠准确,应加以注意。4)对照实验:加入抑制剂L四咪唑等结果为阴性;去底物(孵育液中用10ml蒸馏水代替底物)结果为阴性。 碱性磷酸酶钙-钴染色大鼠小肠绒毛吸收细胞呈
地鼠肾BS-C-1 非注洲绿猴肾C2C12 小鼠成肌细胞C3H 10T1/2 2A6 小鼠成纤维细胞CHOdhfr 二氢叶酸缺陷型中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞COS-1 非洲绿肾COS-7 非洲绿猴肾细胞 CV-1 猴肾细胞 FDC-P1 小鼠正常骨髓细胞 IAR20 小鼠肝细胞 IEC-6 大鼠小肠隐窝上皮细胞 LL-PK1 猪肾细胞 MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞 MDCK 狗肾细胞 MEF 小鼠
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