- ￥2800 - 6200
- 上海研生
- YS-01X7121
- 国产
- 2025年12月29日
企业认证
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型：
否
- 供应商：
上海研生
- 库存：
23
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 物种来源：
人
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞名称：人外周血白细胞
商品货号：YS-01X7121
产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶
方法简介：实验室分离的人外周血白细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：实验室分离的人外周血白细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
人外周血白细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，
37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验
器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL
（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项：
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品：
| 白腹锦鸡皮肤来源细胞 | 阳离子通道相关蛋白δ封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；ZJEB8-01 | 磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2封闭多肽 |
| 家猪皮肤来源细胞 | Ran结合蛋白11封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；ZJED0-02 | 磷酸化周期素依赖激酶2封闭多肽 |
| 人阴茎鳞癌细胞系；Penl1 | TBC结构域家族D15蛋白封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；1-5-2 | 淋巴管内皮透明质酸受体封闭多肽 |
| 白腹锦鸡肌肉来源细胞 | 10号染色体开放阅读框96封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；7-1 | 锌指蛋白516封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；4-2 | 神经突起诱导因子受体UNC5B封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；LT003 | 锌指蛋白770封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；27-1 | 磷酸化Ephrin B封闭多肽 |
| 中国人口腔黑色素瘤细胞；COMM-1 | 硒结合蛋白1封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；LT002 | 人外周血白细胞多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子PSF封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；1-19-1 | 着丝粒蛋白J封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株；23-1 | 富含亮氨酸重复蛋白8D封闭多肽 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验一、自然沉降法 人外周血红细胞与白细胞的比例约为6000～1000:1，两类细胞的沉降速度不同，据此加以分离。自然沉降法是利用红细胞自然沉降率较快加以分离。该法简便易行，对细胞损伤少，但纯度差。 [试剂及配制] （1）无Ca2+、Mg2+，Hank’s液 （2）含10%～20%灭活小牛血清Hank’s液 [操作方法] （1）取静脉血2ml，放入加有抗凝剂的试管中，轻轻混匀； （2）将试管直立静置于室温或37℃
正常人外周血白细胞的分离 一、自然沉降法 正常人外周血红细胞与白细胞的比例约为6000～1000:1，两类细胞的沉降速度不同，进行正常人外周血白细胞分离。 1 、试剂及配制 1）无Ca2+ 、Mg2+ Hank’s液。 2）含10%～20% 灭活小牛血清Hank’s液。 2 、操作方法 1）取静脉血2ml，放入加有抗凝剂的试管中，轻轻混匀。 2）将试管直立
人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血，用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释，上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中，先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液（1.077 g/mL），再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液，血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注：Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温，温度过高会导致分离不明显，温度过低会导致密度过大，同样分离效果不好， 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
