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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
24
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
梭形、多角形
- 物种来源:
小鼠
- 组织来源:
颅骨组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
小鼠成骨细胞分离自颅骨组织;颅骨位于脊柱上方,由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外,其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结,起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部,内有颅腔,容纳脑,共8块。面颅为颅的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等结构,构成面部的支架,共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建,骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域,分泌酸性物质溶解矿物质,分泌蛋白酶消化骨基质,形成骨吸收陷窝;其后,成骨细胞移行至被吸收部位,分泌骨基质,骨基质矿化而形成新骨;破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础,也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。
基本信息:
细胞名称:小鼠成骨细胞
组织来源:颅骨组织
商品货号:YS-01X7315
种属来源:小鼠
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传3代左右
传代比例:1:2
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞试用的实验类型:
原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
公司正在出售的产品:
| 珍珠龙胆石斑鱼吻端组织细胞系;PGSN | 核因子κB抑制蛋白样蛋白1封闭多肽 |
| 鞍带石斑鱼肾脏组织细胞系;GGKD | 精子发生相关蛋白6封闭多肽 |
| 草鱼背鳍组织细胞系;GCDF | 信号通路WNT10B封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;9G2.5 | 丝裂原活化蛋白激酶激酶4封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;H1A2 | HERC4 E3泛素蛋白连接酶封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;2F8 | γ-原肌球蛋白/原肌球蛋白3封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;F3A2 | 干扰素α封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;CH3 | ATP依赖RNA解旋酶DDX55封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;2F2 | 磷酸化细胞周期检测点激酶1封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;4G1 | 造血干细胞特异性相关结合蛋白1封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;1C8 | G蛋白偶联受体49封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;4F2 | 原癌基因CD39样蛋白4/ENTPD5封闭多肽 |
| 人乳腺癌多药耐药细胞株;MCF-7/ROS | 小鼠成骨细胞ATP依赖RNA解旋酶DDX39封闭多肽 |
| 稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-326 | 基质金属蛋白酶2封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;1H9 | 甲胎蛋白封闭多肽 |
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤
掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色
偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验原代培养1.取新生3d以内BALB/c小鼠,断颈处死后立即投入75%酒精中消毒5min(虽有头部皮肤保护,但时间不要过长,所以事先要把准备工作做好之后再去杀老鼠)。2.D-Hank’s液漂洗后分离颅盖骨,刮除骨膜和结缔组织,DMEM清洗颅骨骨片并剪碎。(自我感觉碎一点好一些)3.加入0.25%胰蛋白酶(含0.02EDTA),37°恒温消化20min,吸出消化液,之后1mg/1mlI型胶原酶37°恒温消化20min后离心(1000r/min,5min),弃上清液。(消化时间自己摸索,之前我消化
一、饲养环境 小鼠对环境的适应性的自体调节能力和疾病抗御能力较其他实验动物差,而小鼠的品种和品系繁多,各个品种和品系都有自己的特殊要求,因此必须根据实际情况给予一个清洁舒适的生活环境。不同等级的小鼠应生活在相应的设施中。 小鼠临界温度为低温 10℃,高温 37℃,温度中性范围 30~33℃。饲养环境控制应达到如下要求:温度 18~29℃;相对湿度 40~70%;最好控制在 18~22℃,湿度 50~60%。一般小鼠饲养盒内温度比环境高 1~2℃,湿度高 5~10%。 要保持温度、湿度相对稳定
参与骨组织形成的细胞,由间充质细胞分化而来,骨膜形成后由骨膜的一些细胞分化而成。成骨细胞短柱状,有突起,核圆形,细胞质强嗜碱性。在将要形成骨组织的地方,排列成单层,彼此由突起相连。成骨细胞的主要功能是生成骨组织的纤维和有机基质。在生成有机的细胞间质以后,本身被埋于其中,变为成骨细胞。这时尚无骨盐,称类骨质。随后,有大量骨盐沉积在有机的细胞间质中,即成为骨组织。
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