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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
33
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
长梭形细胞
- 物种来源:
大鼠
- 组织来源:
主动脉组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞名称:大鼠主动脉外膜成纤维细胞
组织来源:主动脉组织
商品货号:YS-01X7643
种属来源:大鼠
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:
培养基:原代平滑肌细胞培养体系
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁生长
细胞形态:长梭形细胞
传代特性:根据细胞特性传代
传代比例:
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气 ,95%; CO2 , 5%
细胞简介:
主动脉是由内膜、 中层弹力层和外膜构成 ,三层紧密贴合在一起。其中 ,外 膜是专门的支持组织 ,外膜成纤维是外膜的主要成分 ,在血管炎症反应、血 管重塑等方面发挥重要作用。

原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项:

1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤
掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色
偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。

公司正在出售的产品:
| 人乳腺癌耐药细胞株,Mcf-7/adr细胞 | 谷氨酰胺磷酸核糖基焦磷酸酰胺基转移酶 |
| 人乳腺癌细胞,Bcap-37细胞 | 溶质载体家族25成员30封闭多肽 |
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| 人乳腺癌细胞,BT-549细胞 | 生长抑制DNA损伤基因45封闭多肽 |
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| 人乳腺癌细胞,MCF-7细胞 | 脑蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶29封闭多肽 |
| 人乳腺癌细胞,MDA-MB-231细胞 | 核受体辅助抑制因子1封闭多肽 |
| 人乳腺癌细胞,MDA-MB-361细胞 | 组氨酸酸性磷酸酶结构域蛋白1封闭多肽 |
| 人乳腺癌细胞,MDA-MB-435s细胞 | 7号染色体开放阅读框57封闭多肽 |
| 人乳腺癌细胞,MDA-MB-435细胞 | 甲基化样蛋白11封闭多肽(N端) |
| 人三阴性乳腺癌,MDA-MB-231+luciferase细胞 | 环指蛋白12封闭多肽 |
| 人舌鳞癌细胞,CAL-27细胞 | 大鼠主动脉外膜成纤维细胞脑转录因子4蛋白封闭多肽 |
| 人舌鳞癌细胞,SCC-9细胞 | 多巴胺受体D2封闭多肽 |
| 人舌鳞癌细胞,Tca-8113细胞 | 异型组蛋白H2A.2封闭多肽 |
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文献和实验材料与方法: 材料 : 培养皿、培养瓶、烧瓶、试管,玻璃针等。 眼科剪、眼科镊、手术刀片。 5%CO2孵箱、PH计。 恒温水浴箱。 PMi1640培养基,D-Hank’s缓冲液 、胎牛血清,内皮生长因子(ECGF),青霉素,链霉素,戊巴比妥钠等。 方法: 1、取材:4~6wWistar大鼠, 大剂量2%戊巴比妥钠麻醉处死,将处死后的大鼠浸入75%酒精中,放入超净台。在无菌状态下剪开胸腹腔,分离胸主动脉,用2ml注射器从主动脉弓处向胸主动脉注入D-Hank’s液,驱除残血,取主动脉
瓶倾斜放置在温箱中,干贴壁2-4 h后,将培养瓶慢慢翻转平放,继续静置培养。注意上述操作过程中动作要轻柔,让液体慢慢覆盖组织小块,严禁动作过快致使液体产生的冲力使粘贴的组织块漂起而造成原代培养失败。48 h后换液,更换2-3 ml即可。 2.6 贴块贴壁72 h后,镜下可见大量的成纤维细胞爬出,将组织块去除,继续培养2-3天,待细胞长满,即可传代。注:因为血清浓度低,内皮细胞可以爬出少量,但是很快就会死掉。 2.7 传代用0.25%胰酶常规消化,以1:2传代,传代完后,采用
颈椎脱臼或颈动脉放血处死后,将整个大鼠泡于75%乙醇中消毒1min。在无菌状态下,逐层剪开胸腔,分离取出主动脉,放含无菌D-Hanks液培养皿中; 2. 用眼科剪、镊尽量去除血管外膜的脂肪和纤维组织。然后,用含抗生素的D-Hanks液冲洗血管的外表面及血管腔内的凝血数次,再放入另一无菌培养皿中; 3. 用眼科剪纵向剪开血管,平展在培养皿中。用非常锐利的手术刀将其切成1.5mm×1.5mm大小的动脉植块,然后种植到培养瓶或培养皿中(培养瓶或皿用1%明胶预置4℃下过夜,使用前2h移入37℃
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