- ￥624 - 5460
- 西格
- XG-P3100
- 国产
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
23
- 保质期：
2 年
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
500U /5000U
| 规格： | 500U | 产品价格： | ￥624.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5000U | 产品价格： | ￥5460.0 |
描述：
虾碱性磷酸酶(Shrimp Alkaline Phosphatase，rSAP)催化 DNA 和 RNA 的 5’和 3’磷酸单脂的去磷酸化反应。该磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，可使线性载体去磷酸化，防止自连。虾碱性磷酸酶在65°C温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活，因此，在连接或末端标记之后，可以不用去除热敏磷酸酶。基于以上特性，该酶是传统去磷酸化酶--小牛肠碱性磷酸酶（CIP）的替代物。
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| XG-P3100 | 虾碱性磷酸酶（SAP） | 500U |
| XG-P3100 | 虾碱性磷酸酶（SAP） | 5000U |
应用
DNA 和 RNA 的去磷酸化防止克隆载体的自连制备 5′末端标记模板
储存：-20℃可保存 2 年。
活性定义：1 单位指在 37°C 条件下，每分钟水解 1umol 的pN（p-Nitrophenyl Phosphate）到 pNP 所需要的酶量。
37°C 孵育 30min。65°C 孵育 5min 进行失活反应。
注意：1 pmol 的 5’末端 DNA，相当于 1 μg 的单酶切质粒 (3kb 大小)。
PCR反应基本步骤：
一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成，每个循环包括以下3个步骤：
变性(Denaturation)：
利用高温（93-98℃）使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前，通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离，仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟，接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
退火或称接合,复性(Annealling)：
在DNA双链分离后，降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
延伸(Extension)：
DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr（来自于嗜热菌Thermus brockianus）约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。
PCR 反应需要使用哪些试剂？
一、模板DNA：PCR反应需要模板DNA，如从细胞、组织、血液中提取DNA等；
二、引物：PCR反应的两个引物，分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域，引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物；
三、dNTPs：PCR反应中需要四种dNTPs，包括脱氧腺苷酸（dATP）、脱氧胸苷酸（dCTP）、脱氧鸟苷酸（dGTP）、脱氧胞嘧啶酸（dTTP），用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程，用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增；四、Taq DNA聚合酶：PCR反应需要的聚合酶，一般使用Taq聚合酶，还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等，用于扩增DNA链；
五、PCR buffer溶液：对PCR反应具有缓冲作用，调节反应pH，硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛，可增强PCR反应特异性，从而提高反应效率；
六、酶切体系：PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤，常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准，用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒：用于纯化PCR反应产物；
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文献和实验SABC 法与其他免疫组织化学染色方法比较 SP法或SAP法 该法由于用链霉亲和素替代ABC法中的亲和素―生物素复合物，因此背景清晰，敏感性增加，无非特异性染色，阳性反应易于辨认。是目前最常用的方法。在操作步骤中，与SABC法相比，仅有一个步骤不同，即试剂盒中的链霉菌抗生物素―过氧化物酶替代了亲和素―生物 素―过氧化物酶。因此无需使用生物素阻断剂消除内源性生物素。SP法与SAP法的区别在于前者的放大系统为链霉亲和素―过氧化物酶，后者是链霉亲和素―碱性磷酸酶，故导致
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