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Virus DNA/RNA c
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54
3 年
上海西格
-20°C
100T
描述:本试剂盒采用稳定高效的反转录预混体系 5×Golden RT MasterMix 进行 RNA 的反转录反应,使用时只需加入模 板、引物和 RNase Free H2O 即可,大大简化了操作过程、 提高了效率、减少了操作过程中的人为误差。具有快速简便、 重复性高、特异性好、灵敏度高和稳定性好的特点。专用于 病毒 DNA/RNA 样品的反转录反应。 该预混体系包含点突变致 RNase H 活性缺失的 Golden MLV Reverse Transcriptase 反转录酶、dNTP、反应 Buffer 和 RNase Inhibitor。该试剂盒采用的反转录酶去除了 RNase H 活性,从而避免反转录过程中降解 RNA。同时经过突变文 库筛选,使得其热稳定性更强,可耐受 55℃高温反应。相比 于低温条件下反转录反应,采用高温反转录可显著打开 RNA 二级结构,从而提高复杂 RNA 模板的扩增性能、提高反转 录 cDNA 的长度和产量,从而提高后续检测的灵敏度。合成 的第一链 cDNA 可广泛用于 2nd Strand 的合成、杂交、PCR 扩增、Real-Time PCR 反应等。
组分储存:请置于-20°C,可保存 3 年;避免反复冻融。注:如 5×Golden RT MasterMix 出现沉淀属正常现象,可用手捂化,混合均匀后使用不影响实验结果。一步法 cDOn1. 按以下组分配制反转录反应液病毒 DNA/RNA 样品 2~10μl5×Golden RT MasterMix 4μl*20×Random Primer 1μlRnase Free H2O Up to 20μl*注:反转录引物可根据需要改用特异性引物。2.根据实际情况反转录可选择快速程序或标准程序快速程序 37°C 15~30min(cDNA 合成) 85°C 5min(失活 MLV)标准程序 25°C 10min(引物配对) 55°C 30~60min(cDNA 合成) 85°C 5min(失活 MLV)注:通常在定量 PCR 实验中使用快速程序进行反转录(反转录效率>80%),在进行高 GC 含量、含复杂二级结构、长片段的模板转录时采用标准程序(反转录效率>100%)。
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