- ￥780
- 西格
- XG-P2998
- 国产
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
30
- 保质期：
2 年
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
-20°C 以下
- 规格：
4000U
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| XG-P2998 | Murine Rnase inhibitor(40U/ul) | 4000U |
描 述 ：
本产品系重组表达得到的鼠源 RNA 酶抑制剂，可与 RNase 非共价结合，形成 1:1 的复合物，具有广谱的 RNase 抑制活性。相比于人源 Rnase Inhibitor，鼠源抑制剂对还原 剂不敏感。
单位定义：抑制 5 ng RNase A 的 50%活性所需的 RNaseInhibitor 量定义为一个活性单位。
应用：
cDNA 合成反应
体外无细胞系统转录或翻译提高多聚核糖体的产量和活性
储存：-20°C 可保存 2 年。
使用方法
1. 按以下组分配制反应体系
Golden MLV Reverse Transcriptase 0.5-1 μl
10×RT Buffer 2 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 1 μl
Total RNA or Poly(A) RNA 0.1-2 μg
20×Oligo dT(25)&Random Primer * 1 μl
Murine RNase Inhibitor (40 U/μl) 0.5 μl
RNase Free H2O Up to 20 μl
*注：Oligo dT(15)使用浓度为 20~50μM, 如使用 Random9随机引物可使用 125μM，基因特异性引物可使用 5μM。
2．在 PCR 仪上按下列条件进行反转录反应
30°C 15 min
55°C 30~60 min
85°C 10 min
4°C
3. 反转录所得的 cDNA 可直接用于 PCR 反应或储存于-20°C。
PCR反应基本步骤：
一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成，每个循环包括以下3个步骤：
变性(Denaturation)：
利用高温（93-98℃）使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前，通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离，仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟，接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
退火或称接合,复性(Annealling)：
在DNA双链分离后，降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
延伸(Extension)：
DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr（来自于嗜热菌Thermus brockianus）约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。
PCR 反应需要使用哪些试剂？
一、模板DNA：PCR反应需要模板DNA，如从细胞、组织、血液中提取DNA等；
二、引物：PCR反应的两个引物，分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域，引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物；
三、dNTPs：PCR反应中需要四种dNTPs，包括脱氧腺苷酸（dATP）、脱氧胸苷酸（dCTP）、脱氧鸟苷酸（dGTP）、脱氧胞嘧啶酸（dTTP），用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程，用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增；四、Taq DNA聚合酶：PCR反应需要的聚合酶，一般使用Taq聚合酶，还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等，用于扩增DNA链；
五、PCR buffer溶液：对PCR反应具有缓冲作用，调节反应pH，硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛，可增强PCR反应特异性，从而提高反应效率；
六、酶切体系：PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤，常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准，用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒：用于纯化PCR反应产物；
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