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Taq Plus DNA Polymerse(5U/ul)

高产量聚合酶
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  • 西格
  • XG-P2806
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  • 2025年07月11日
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    • 保质期

      12 个月

    • 供应商

      上海西格

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      500U

    公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
    货号 产品名称 规格
    XG-P2806 Taq Plus DNA Polymerse(5U/ul)  高产量聚合酶 500U
    储存条件:-20℃保存
    产品细节图片1

     制品说明:
      Taq Plus DNA Polymerase 是Taq DNA Polymerase与Pfu DNA Polymeraser 混合物。在PCR反应中Taq Plus DNA Polymerase延伸速度为1-2 kb/min,产物3′端带A,可直接用于TA克隆,若需提高克隆效率,建议先纯化加A后进行TA克隆。
    酶贮存缓冲液:
    20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1 mM EDTA, 1mM DTT, 100 mM KCl, Stabilizers, 50% glycerol。
    5×Taq Plus Buffer (含Mg2+):
     100 mM Tris-HCl (pH 8.4), 100 mM KCl, 50mM(NH4)2 SO4,7.5mM MgCl2,其他成分。
    适用范围:一般用于DNA片断的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等,产物可以直接用于TA克隆。
    PCR反应基本步骤:
    一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:
    变性(Denaturation):
    利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
    退火或称接合,复性(Annealling)
    在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
    延伸(Extension):
    DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。

    产品细节图片2
    PCR 反应需要使用哪些试剂?
    一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
    二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
    三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
    五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
    六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
    七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
    八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
    产品细节图片3
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