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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
42
- 保质期:
12 个月
- 供应商:
上海西格
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1ml×100
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
PCR反应基本步骤:
一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:
变性(Denaturation):
利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
退火或称接合,复性(Annealling):
在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
延伸(Extension):
DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。
PCR 反应需要使用哪些试剂?
一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
公司供应的相关产品:
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| XG-P2802 | 1×Fast Taq MasterMix(purple) (3×Taq Mix快速扩增即用型预混液) | 1ml×100 |
保存条件:-20℃保存。

产品介绍:
1×Fast Taq预混液中包括Fast Taq DNA聚合酶,dNTPs,染料及PCR反应所需的缓冲液,是一种即用型PCR扩增试剂。
使用时,只需加入引物和DNA模板即可进行PCR扩增, 引物和模板的加入总体积可以在1-10μl间变动,具有很强的可调性。该PCR预混液能节省实验时间,避免了常规PCR试剂多次加样造成的实验污染
。预混液本身含有染料,扩增完成后可直接上样,进行电泳检测。Fast Taq DNA聚合酶扩增速度为6kb/分钟。扩增1kb以下片段时,延伸时间设置为5秒∕kb;扩增1kb至5kb以下片段时,延伸时间设置为10秒∕kb;
扩增5kb以上片段时,延伸时间设置为15秒∕kb。如遇困难模板时,延伸时间设置为20秒∕kb。
产品用途:常规PCR扩增,菌落PCR,TA克隆用的PCR片段扩增,RT-PCR。
PCR反应基本步骤:
一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:
变性(Denaturation):
利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
退火或称接合,复性(Annealling):
在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
延伸(Extension):
DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。
PCR 反应需要使用哪些试剂?
一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
公司供应的相关产品:
| 细菌通用染料法qPCR试剂盒 | 原钙黏素1ELISA试剂盒 PCDH1免费代测试剂 |
| 火鸡肠炎冠状病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | Ⅱ型前胶原ELISA试剂盒 PCⅡ免费代测试剂 |
| 拟杆菌属通用PCR检测试剂盒 | 肌动蛋白γ1ELISA试剂盒 |
| 禽病毒性关节炎PCR检测试剂盒 | ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4ELISA试剂盒 |
| 斑点气单胞菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | Bcl2关联永生基因3ELISA试剂盒 |
| 猪链球菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | B细胞受体ELISA试剂盒 |
| 猪生殖与呼吸综合症病毒通用PCR检测试剂盒 | CD276分子ELISA试剂盒 |
| 白喉棒杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | Codanin1蛋白ELISA试剂盒 |
| 白乐杰马杜拉放线菌PCR检测试剂盒直销 | CytospinA蛋白ELISA试剂盒 |
| 猪萨佩罗病毒PCR检测试剂盒 | Epiprofin蛋白ELISA试剂盒 |
| 阿留申病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 猪巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa试剂盒 |
| 猪轮状病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)检测试剂盒elisa |
| 大豆源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1×Fast Taq MasterMix(purple) (3×Taq Mix快速扩增即用型预混液)鸡热休克蛋白60(Hsp-60)试剂盒elisa |
| 鹅裂口线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA检测试剂盒 |
| 蓝舌病病毒型PCR检测试剂盒 | 大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒 ELISA |
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1×Fast Taq MasterMix(purple) (3×Taq Mix快速扩增即用型预混液)
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