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90天
- 英文名:
pCDNA3.1-EGFP-3×Linker-E(HCoV-OC43)
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pCDNA3.1-EGFP-3×Linker-E(HCoV-OC43)
货号:KM1028177
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:病毒
原核抗性:Amp
真核抗性:Neo/G418
荧光标记:绿色
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文献和实验-MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶;小牛血清;G418;DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter;含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2,获得长4.7 kb的EBVR,包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP,克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill
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片段末端接上合适的接头(linker)或衔接头(adapter)使其匹配,也可以有控制的使用E. coli DNA聚合酶Ⅰ的klenow大片段部分填平3’凹端,使不相匹配的末端转变为互补末端或转为平末端后再进行连接。 4.1.2 DNA连接酶类型 能用于连接DNA的酶有2种:大肠杆菌连接酶和大肠杆菌T4噬菌体所编码的T4-DNA连接酶。前者的反应需要NAD+参与催化,而T4连接酶的反应则需要ATP参与催化。最初的研究表明,大肠杆菌连接酶只能催化粘端的连接,现在发现在PEG或聚蔗糖存在的条件
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