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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-80℃
- 保质期:
90天
- 英文名:
pBV220-EK
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pBV220-EK
货号:KM101528
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:蛋白酶
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验温度诱导型原核表达载体pBV220工作原理及全序列 实验原理 PLPR启动子是大肠杆菌l噬菌体中控制早期转录的启动子,具有极强的起始RNA转录的功能,基因工程中常用它来构建高效表达载体,它受抑制物CI蛋白的负调控。在实际中CI蛋白被改造成温度敏感型(CIts),由DNA片段CIts857(857bp长)编码。CIts在30℃时具有抑制启动子的活性,在42℃时失活而失去抑制启动子的活性,因此,改变工程菌的培养温度即可控制目的基因的表达,这一点比用诱导剂诱导表达的系统要节省操作步骤和成本
表达效率往往更高。 将IL基因以5’端 Eco RI和3’端 Bam HI酶切位点插入pBV220载体多克隆位点中,转化到大肠杆菌JMl03内,便能通过温度的变换控制CI蛋白的活性,继而调节启动子的活性,使IL基因连同其5’端上游带SD序列转录成mRNA并转录终止于rrnB位点,SD序列与ATG的间距为6bp,mRNA作为模板使核糖体高效翻译出IL产物。 实验材料和试剂 (一)实验材料
/actions/archive/post/24367 79_0.htm pBI 121表达载体的图谱:http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2887599_0.html PBV220的物理图谱:http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3344331_0.html 真核表达载体pEE14的图谱:http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3520950_0.html
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