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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
赛默飞世尔科技
- 保存条件:
-20°C存储。 临时存储可在 4°C,最多放置4个月。
- 规格:
500 RXN
乾坤™ 白金™ SYBR™ Green 预混液是一种预配制、优化的通用型 2X 预混液,适用于实时荧光定量 PCR 工作流程。与用户提供的引物和模板相结合,设计用于扩增靶标,以实现精确的基因表达分析。该预混液包含 UNG 和 dUTP,能够降解前序反应残留的qPCR产物,并有助于防止后续 qPCR 反应的污染。有效期长达两年,能更好的满足科研实验需求。
乾坤™ 白金™SYBR™ Green 预混液产品特性:
• 兼顾灵敏度和特异性:保障染料法检测的特异性,同时具有更小的 Ct 值
• 高强度荧光信号:更大的扩增曲线 dRn 值,更高的平台期荧光信号
• 宽动态范围:可在跨 6 log动态范围内进行精准检测,并确保可靠的线性
• 桌面稳定性高:配置好的 qPCR 反应体系可以在室温下稳定保存72小时,便于安排上机时间
• 批间一致性高:生产过程遵循 ISO 9001 质量管理体系,保证数据的稳定性和重复性
• 抗残留污染:采用 UDG 和 dUTP 配方,杜绝残留扩增产物污染造成的假阳性结果
此 2x 预混液包括:
• SYBR Green 染料
• Taq DNA 聚合酶
• 具有 dUTP/dTTP 混合物的 dNTP
• 热不稳定 UDG
• ROX 惰性参比染料
• 优化的缓冲液
包含 1 X 5 mL 管,可用于500次反应(20 µL反应体系,每次反应用 10 µL)
优异特异性和灵敏度的结合
乾坤白金 SYBR Green 预混液含有 Taq DNA 聚合酶,该聚合酶受到抗体介导的热启动机制的严格控制,有助于防止聚合酶在低温下出现不符合预期的早期活性,从而导致非特异性扩增。
乾坤™ 白金™ SYBR™ Green 预混液专为在最具挑战性的实时 PCR 应用(如高 GC 含量,低丰度或长扩增子靶标)中实现卓越性能而设计,具有高灵敏度和特异性。
高强度的荧光信号
乾坤白金 SYBR Green 预混液持续发出强烈的荧光信号,远高于背景,从而产生背景信号更低、更加稳定的结果。扩增曲线平台期的荧光值是其他预混液的2倍以上。
宽动态范围
乾坤白金 SYBR Green 预混液可以产生多达6个动态范围的数据(见图),并且与其他预混液相比,在检测各种目标时显示出等效或更好的动态范围。
台面稳定性高
乾坤白金 SYBR Green 预混液经过设计,可在室温下配置反应体系后,放置72小时仍保持高水平的性能。
图片显示了在制备时(T0)和在室温下放置72小时后(T72)进行的反应稳定性。
批间一致性高
乾坤白金 SYBR Green 预混液遵循 ISO 9001 质量管理体系,这有助于确保生产过程的可追溯性,并建立从原材料采购到产品发布的质量控制点,有助于生产具备更高批次一致性、更高稳定性及更高重复性的预混液(见图)。
抗残留污染
乾坤白金 SYBR Green 预混液中加入了尿嘧啶脱氧核糖核酸糖苷酶 (UDG) 和 dUTP,能够降解任何先前扩增的PCR产物,有助于防止后续 qPCR 反应的污染和可能的假阳性。
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文献和实验液为预先优化好的混合物,通常包含缓冲液、DNA聚合酶、dNTP、MgCl2及其他专利的添加剂。 一些专业人士坦言,对于多个指标,包括qPCR 效率、特异性、灵敏度、速度及耐受多个循环条件和样品类型,目前还尚未实现完美的平衡。大部分qPCR预混液能够在一些方面胜出,但很难是全部。如何选择最适合的那一个,小编下面给出了一些建议。 探针 还是染料? 当然,就多重分析而言,探针法是唯一选择。SYBR Green只适合单重反应。不过,SYBR Green的优势
SYBR Green Quantitative PCR Protocol
12μl of master mix for each well, plus some excess1 Rxn: 10μl SYBR Green Mix 52 Rxn: 520μl SYBR 0.4μl Forward Primer (10μM stock) 20.8μl F
REAL TIME PCR WITH SYBR GREEN I 建议PROTOCOL
1、反应体系 25ulCocktail 20 ul: Primer FP 1 ul + Primer RP 1u + 2 * SYBR GREEN I MIX 12.5 + H2O 5.5 ul cDNA 5 ul2、Primer 浓度,需要摸索,从200nM到700nm等,设置不同浓度。3、每个引物浓度,从well 1到12设置4个样本,阳性cDNA 1和2,NTC以及H2O,做triplicate。4、若用ABI7000或7700,所有的PCR条件可设置成一致的,减少麻烦,当然,引物
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