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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
20
- 检测方法:
微量法、可见分光光度法
- 规格:
50管/24样/100管/48样
| 规格: | 50管/24样 | 产品价格: | ¥598.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100管/48样 | 产品价格: | ¥325.0 |
| 产品名称 | 辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒 |
| 规格 | 50管/24样、100管/48样 |
| 测试方法 | 微量法、可见分光光度法 |
| 货号 | LZ-S011 |
测定意义
辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
注意事项:
1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM (推荐浓度50-200 μM,具体依细胞类型而定) 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞,活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高,可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强,可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2.实验过程中,如果阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA,使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整,尽量缩短读片时的曝光时间,并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品,并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
3.探针装载后,一定要洗净未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
| 4香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)测试盒 | HCT-116细胞 |
| 4香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)测试盒 | RKO细胞 |
| 6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒 | NCI-H446细胞 |
| 6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)盒 | SK-MES-1细胞 |
| 6磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脱氢酶测试盒 | NCI-H226细胞 |
| 6磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脱氢酶测试盒 | NCI-H1755细胞 |
| ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒 | A549细胞 |
| ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒 | NCI-H358细胞 |
| ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒 | NCI-H1650细胞 |
| ADP含量测试盒 | HCC827细胞 |
| AMP含量测试盒 | NCI-H661细胞 |
| ATP含量测试盒 | NCI-H460细胞 |
| ATP含量测试盒 | SNU-475细胞 |
| ATP含量测试盒 | SNU-398细胞 |
| ATP柠檬酸裂解酶(ACL)测试盒 | SNU-387细胞 |
| ATP柠檬酸裂解酶(ACL)测试盒 | SNU-182细胞 |
| BCA蛋白法含量测试盒 | SK-HEP-1细胞 |
| BCA蛋白法含量测试盒 | QGY-7703细胞 |
| Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒 | HuH-7细胞 |
| Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒 | HepG2细胞 |
| H2S含量测试盒 | NCI-H520细胞 |
| H2S含量测试盒 | NCI-H441细胞 |
| L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒 | NCI-H292细胞 |
| L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒 | 辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒NCI-H1975细胞 |
| Na+k+ ——ATP酶测试盒 | Calu-3细胞 |
| Na+k+ ——ATP酶测试盒 | Calu-1细胞 |
| NADH氧化酶(NOX)测试盒 | Saos-2细胞 |
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文献和实验一、目的脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法。通过本实验的学习,掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法。二、原 理本实验采用索氏抽提法中的残余法,即用低沸点有机溶剂(乙醚或石油醚)回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品
漏斗冲入100mL 容量瓶中,加水达70-80mL,摇匀后置于80℃恒温水浴上浸提0.5h。 待上述样品冷却后,沉淀蛋白质,加入5%硫酸锌5mL,再慢慢滴入0.3mol/L Ba(OH)2 5mL,以沉淀蛋白质。振荡后静置,至上层出现清液后再加一滴Ba(OH)2,直至无白色沉淀时,向容量瓶加水至刻度。 3.还原糖含量的测定: 过滤上述已定容的样品液,取5mL 滤液,再定容到100mL(此步视样品的含糖量而定)。取已稀释的溶液2mL,与标准葡萄糖显色法相同:加铜试剂2mL,煮沸10min,加砷钼
异柠檬酸脱氢酶 isocitrate dehydrogenase
异柠檬酸脱氢酶 isocitrate dehydrogenase 有两种类型的酶:要求以 NAD为辅酶的酶( EC1. 1. 1. 41)和要 NADP的酶( EC1. 1. 1. 42),两者催化同一反应。 异柠檬酸 NAD( P) α -酮戊二酸 CO2 NAP( P) H H4 在三羧酸循环中正常起作用的是要求 NAD为辅酶的酶,此酶是为 ADP激活的变构酶。
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