ExoLoad®外泌体核酸负载试剂盒-miRNA/siRNA

一、产品介绍：

ExoLoad^® 外泌体核酸负载试剂盒是可快速、便捷、高通量、高载量地将siRNA、microRNA、ASO等小核酸导入外泌体中，用于小核酸递送的功能研究以及工程化外泌体研究。

 

二、产品概述：

外泌体是细胞主动分泌到胞外的用于细胞间通讯的天然载体，由于其具有免疫源性低、穿透性高、可工程化修饰、能装载核酸和蛋白等不同类型药物等诸多优势，被评为新一代药物递送平台。工程化外泌体正在成为小核酸分子的重要载体。

恩泽康泰开发的ExoLoad^®试剂盒是通过定制开发针对外泌体的专属转运肽ETP（Exosome-Transit Peptide），将siRNA、microRNA、ASO等RNA类型小核酸高效导入外泌体中，可方便快速实现外泌体小核酸的高效装载，用于小核酸递送的功能研究以及药物治疗研究。

 

三、产品规格：

 

四、产品优势：

1.便捷：无需特殊设备，全程仅需3h即可完成装载，动手时间不超30min；

2.通量大：单次反应最高可负载9E+12 particles的外泌体；

3.载量高：外泌体装载效率高达500 copies/外泌体，与电转相当；

4.效果好：测试结果显示负载外泌体对受体细胞的递送率高达99%，可有效调控受体细胞的靶基因表达；

5.安全性好：对受体细胞未显示毒副作用；

6.应用范围广：可兼容ASO、miRNA、siRNA等RNA类型的小核酸；

7.高质量文献引用：有效辅助客户文章发表，获得用户广泛好评。

 

五、产品图片

ExoLoad^®对外泌体的形貌、尺寸和标志蛋白均不会产生影响。

ExoLoad^®可有效装载ASO、miRNA、siRNA等不同类型小核酸，载量媲美电穿孔。

ExoLoad^®负载后的外泌体作用于受体细胞后，具有极高的核酸递送效率。

 

ExoLoad^®负载后的外泌体被受体细胞摄取后，可有效调控受体细胞的靶基因表达。

 

ExoLoad^®负载的外泌体对细胞未显示出毒副作用。

六、常见问题

Q：负载后的外泌体，保存条件及稳定性？

A：负载后在12小时内使用最佳，如果达不到，建议4℃放置3天内，最多不能超过7天。

 

Q：试剂盒保质期及转运肽溶解后的保质期？

A：试剂盒保质期一年，建议在有效期内使用，转运肽溶解后4℃一年内稳定。

 

Q：跟脂锚联用的推荐操作方法？

A：建议先进行脂锚，后进行ExoLoad^®。

 

Q：ExoLoad^®负载在外泌体表面还是内部？

A：表面、内部都会有。可参考该文献，文献中显示约一半位于外泌体内部，RNase处理可降解掉40%多的表面核酸：Tong L, Wang Q, Zhang Y, et al. Myocardial delivery of miR30d with peptide-functionalized milk-derived extracellular vesicles for targeted treatment of hypertrophic heart failure. Biomaterials. 2025;316:122976.

Q：细胞导入小核酸可以用ExoLoad^®么？有相关实验数据吗？

A：这不是我们产品关注的方向，暂无相关实验数据，理论上可行，但是不清楚ExoLoad^®里面会不会有杂质影响细胞。

 

Q：长链RNA或circRNA的装载是否可以用ExoLoad^®？

A：ExoLoad^®小核酸负载试剂盒是专门用来在外泌体中装载18-30nt的小核酸的。lncRNA或circRNA装载，目前我们没有测试过，从理论上讲效果不佳，有兴趣老师可以自行测试，操作方便出结果快可以快速试错。

 

Q：储存温度和运输温度？

A：运输是冰袋，短期可暂放4℃，如果长期可根据说明书建议条件进行存放。

 

Q：大包装的一定能处理30只小鼠吗？

A：我们大包装的规格是1.5E+12*6T，外泌体的投量是9E+12particles，按照1/3回收效率可以拿到3E+12 particles外泌体，若每只鼠的处理剂量约1E+11，这个换算的话可以拿到处理30只小鼠的量。具体处理小鼠的量可以根据客户的处理剂量在这个范围上下波动。

 

Q：我的外泌体不是来源于293细胞，也可以用这款试剂盒吗？

A：首先，可以肯定的是我们不同客户使用反馈都非常好，他们的外泌体来源存在非常多的种类差异。其次，不可否认不同来源外泌体的负载效率会有差异，就像负载不同的小核酸一样，负载效率不会完全一样。再次，从原理上，不同来源的外泌体虽然都是双层膜结构，所带电荷会略有差异，但都呈负电，所以负载效率会有差异，但ExoLoad^®仍可发挥负载的功能。最后，基于相同原理的负载，有文章比较过MSC外泌体、尿液外泌体和牛血清外泌体的负载差异，qPCR检测结果相差较大，但都能够将miRNA负载进外泌体中。最后，有文章使用恩泽康泰ExoLoad^®试剂盒进行了MSC外泌体小核酸的负载，详情见下面的引用文献。

 

Q：试剂盒的回收率有多少？

A：我们的正装（ELSR-06-02、ELSR-06-03）中会赠送密理博的100KD超滤管，用超滤来回收，根据外泌体纯度不同回收率会有差异，我们的每次回收率基本维持在30-40%。

 

Q：试剂盒有没有发过文章？

A：

1、Liangyu Mi et al. Human umbilical cord mesenchymal stem cell-derived exosomes loaded miR-451a targets ATF2 to improve rheumatoid arthritis. International Immunopharmacology 127 (2024) 111365

2、Kuo Shen et al. miR-125b-5p in adipose derived stem cells exosome alleviates pulmonary microvascular endothelial cells ferroptosis via Keap1/Nrf2/GPX4 in sepsis lung injury. Redox Biol  62 (2023) 102655