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文献和实验到定量,近年来,由于检验技术的进步,可用极敏感的方法来定量原来在“正常范围”的CRP。可定量3毫克/升以下者被叫做高敏感性(高敏)CRP( high sensitive CRP, hsCRP)。 可定量1毫克/升以下的CRP(健康人的血清中不超过1毫克/升),被叫做超敏感(超敏)CRP(super sensitive CRP, ssCRP),从而发现了它的更重要的临床应用价值。 一、诊断各种急、慢性炎症。患者血清中CRP均会迅速升高,升高的幅度可达50~100倍。令人满意的是,它的升高程度与炎症
我最近两个月一直在做 ECL western,非常困难,都快做疯了。但是,功夫不负有心人,最终还是把困难的非特异条带和背景问题解决了。 经过此番,我总结了几条心得与大家分享: 第一条 不要用平底小盒或杂交袋,用可以旋转的杂交管(可以用 50 ml 塑料离心管做成),我刚刚得到了比较结果,效果大不一样。 第二条 膜在 blocking 前先用 stripping buffer 处理一下(当然也在杂交管中进行,注意要通过旋
过夜具体多长时间算合适,其实没有硬性规定; 二抗孵育的时间不宜过长,一般是室温下摇床孵育 1~2 小时,抗体孵育完成后要清洗干净,特别是二抗孵育完成后,否则可能导致显影结果出现高背景。 6、发光液配置 大部分实验室使用的 ECL 发光液,A 液和 B 液按照 1:1 的比例配置; 发光液要求现用现配,每次根据使用量合理配置用液量; 发光液配置时间过长同样会引起发光效果不好,背景脏或者漆黑一片。
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