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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
48
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠颈动脉平滑肌细胞 | T25瓶 | LZ-YX10138 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 人肾癌Wilms细胞;G401 | mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓 小鼠精母细胞,GC-2spd细胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮细胞) |
| MKN-45细胞,人低分化胃癌细胞 人神经母细胞瘤细胞,BE(2)C细胞 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2 | 酸化活化转录因子4抗体 |
| 小鼠星形胶质细胞(MA)(5×105) CaEs-17, 人食管癌细胞株 Human | 重组白细胞介素18抗体 |
| 肺动脉成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | 酸化细胞信号转导分子SMAD3抗体 |
| II型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL | 滋养层细胞抗原3β7抗体 |
| EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0907 | 酸化三羟基三甲基辅酶A还原酶抗体 |
| CL-0170NG108-15(小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞)5×106cells/瓶×2 | 转录辅助因子退变样蛋白3抗体 |
| 雪旺细胞培养基SCM | 酸化转录调节因子CEBP β抗体 |
| 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D3 | 酸化活化转录因子4抗体 |
| SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞 | 重组白细胞介素18抗体 |
| HHCC(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 酸化细胞信号转导分子SMAD3抗体 |
| PC-3M 1E8细胞,人前列腺癌细胞高转移亚系 大鼠垂体瘤细胞,MMQ细胞 人扁桃体上皮细胞HTEpiC | 滋养层细胞抗原3β7抗体 |
| 小鼠颈动脉平滑肌细胞MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人癌细胞 Human | 酸化三羟基三甲基辅酶A还原酶抗体 |
| 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1 胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解缓冲液) 1mL | 转录辅助因子退变样蛋白3抗体 |
| 人类原巨核细胞型白血病细胞;UT-7 | 酸化转录调节因子CEBP β抗体 |
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; a journal of technical methods and pathology. 2017;97(8):935-945. 小提示 使用AAV9-Pcsk9-D377Y构建动物模型可以选择联合部分颈动脉结扎术(PCL),快速诱导斑块的形成,虽然说动脉粥样硬化是是多种因素共同诱导的疾病,但是血流紊乱区域常常是动脉粥样硬化开始发展的地方。这样也使得小鼠的病变的位置变得可控,对模型的影响更加单一,减少其他因素的影响。部分颈动脉结扎引起的动脉粥样硬化的分子机制与人动脉粥样硬化易发区域(如主动
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