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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
43
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠肠成纤维 | T25瓶 | LZ-YX9729 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| ITGA5&ITGB6 Others Human 人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) | 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC |
| 小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP | 胸苷酸化酶抗体 |
| 人低侵袭性脉络膜黑色素素瘤细胞;OCM-1A | 转录因子E2F6抗体 |
| IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) | 真核翻译起始因子3A抗体 |
| HPB-ALL细胞,T细胞白血病细胞 人前列腺癌细胞高转移亚系,PC-3M 1E8细胞 人心脏成纤维细胞总RNAHCF NA | C2GNT3蛋白抗体 |
| SCARB2 Others Mouse 小鼠 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MARK4抗体 |
| CD40LG Others Canine 狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) | 细胞色素P450单氧化酶抗体 |
| HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) | γ1氨基受体α5/GABRα5抗体 |
| REG1B Others Human 人 REG1B / PSPS2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 2-氨基双加氧酶抗体 |
| APOA1 Others Human 人 ApoAI 人细胞裂解液 (阳性对照) | 神经肽S受体1/G蛋白偶联受体154抗体 |
| CCNA1 Others Human 人 CCNA1 / Cyclin-A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 视网膜短链脱氢酶/还原酶家族7抗体 |
| CL-0436SF17(人脑瘤细胞)5×106cells/瓶×2 | 己糖激酶3抗体 |
| 大鼠肠成纤维CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人细胞裂解液 (阳性对照) | 9号染色体开放阅读框16抗体 |
| 猫星形脑胶质细胞;PG-4(S+L-) | KLHDC8A蛋白抗体 |
| EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 8号染色体开放阅读框192抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验丁香园网友hyong915的观点为:成纤维细胞培养(一) 原代培养1、在手术室无菌条件下,切取新鲜的皮肤,增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织,修除表皮和皮下组织,盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内,Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液,眼科剪反复剪切组织块成0.5-1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上,组织块间留约0.3-0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞,放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
纤维分为天然纤维和化学纤维两大类。棉、麻、丝、毛属天然纤维。化学纤维又可分为人造纤维和合成纤维。人造纤维是以天然高分子纤维素或蛋白质为原料,经过化学改性而制成的,如粘胶纤维 ( 人造棉 ) 、醋酸纤维 ( 人造丝 ) 、再生蛋白质纤维等。 合成纤维是由合成高分子为原料,通过拉丝工艺获得纤维。合成纤维的品种很多,最重要的品种是聚酯 ( 涤纶 ) 、聚酰胺 ( 尼龙、锦纶 ) 、聚丙烯腈 ( 腈纶 ) ,它们占世界合成纤维总产量的 90 %以上。此外还有聚乙烯醇缩甲醛
liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊,更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期,谢谢! zhujoker 估计都没人做过,你如果需要观察其生物学功能,就自己做一次,也算原创了啊! freecell 这里有: http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意
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