- ￥65.60
- 康瑞纳
- 进口/国产
- LC21106
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
Inert atmosphere,Room Temperature
- 保质期：
2年
- 英文名：
2-(1H-Imidazol-2-yl)pyridine
- 库存：
999
- 供应商：
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号：
18653-75-3
- 规格：
250mg
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文献和实验mM咪唑）悬浮，100ml用5~10ml缓冲液（约当2~5ml每克菌量），视悬浮后的菌液浓度而定；5、反复冻融法破碎细胞：做到14步时由于时间原因不能立即继续后面的操作，可将菌悬液放于-70℃冰箱中冷冻；也可用反复冻融的方法来破碎细胞，在-70℃冻融，在室温下溶解，反复冻融3~4次；6、加Lysozyme至1mg/ml（1ml加10ul），在冰上孵育30min~1h；7、200~300W超声破碎，2s×30次，停顿2s；若菌种较多可以增加破碎次数。注意超声破碎时间，不可太长，否则温度升高易导致蛋白
序列。虽然绝大多数原核基因没有剪切或聚腺苷过程，但这些真核过程需要的保守序列可能存在于原核基因中，因此当这些基因在真核细胞中表达时可能引起特异的问题。而且诸如哺乳动物和单子叶植物细胞的特异真核表达系统可能不能有效地表达无内含子的基因。 真核mRNA在离开细胞核进而在胞浆的核糖体上被翻译前需要特异的处理和修饰。这些过程包括去除内含子、5'端甲基化帽子形成和3'端加poly-A。内含子去除需要5'剪切位点、G75/G100U100A65AG65U保守序列、3'剪切位点、富含密啶NC66A100G100/G
/LdGTP，0.75 mmol/LdTTP，0.25mol/LFITC-12-dUTP]，40ul/每片，37℃孵育30min，不洗，每张切片加入1ulφ29 DNA聚合酶（0.4U/ul），37℃继续反应30min，PBS洗3×3min。（5）免抗FITC-AKP结合物1:1000稀释，37℃30min;PBS洗3× 3min；0.02mol/LTris-HCl（pH9.0内含氯化镁、左旋咪唑）洗20min.（6）NBT/BCIP显色30~240min，核固红衬染。（7）常规树胶封片，结果观察。
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