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文献和实验纯化最常用的方法之一,是亲和层析法,借助标签和配体的亲和力进行蛋白纯化。纯化的重组蛋白通常能以特异性的方式被洗脱,例如,在 Strep 标签蛋白纯化中,加入生物素(biotin)即可断开 Strep 标签与配体 Strep - Tactin 的作用,达到有效洗脱的目的。得到高纯度有活性的蛋白质应用在多种下游实验中,如研究蛋白质间相互作用等。 那么是否可以以此为基础,将标签配体亲和力加以利用,结合免疫识别特性,用温和的方法得到高纯度的目的细胞呢? 一、「画龙点睛」的表位标签—— Fab
用的方法之一,是亲和层析法,借助标签和配体的亲和力进行蛋白纯化。纯化的重组蛋白通常能以特异性的方式被洗脱,例如,在 Strep 标签蛋白纯化中,加入生物素(biotin)即可断开 Strep 标签与配体 Strep-Tactin 的作用,达到有效洗脱的目的。得到高纯度有活性的蛋白质应用在多种下游实验中,如研究蛋白质间相互作用等。 那么是否可以以此为基础,将标签配体亲和力加以利用,结合免疫识别特性,用温和的方法得到高纯度的目的细胞呢? 1、「画龙点睛」的表位标签——Fab-Streps 抗体
上 Strep-tag 的 Fab 片段(Fab-Streps)特异性的结合到琼脂糖基质上。随后,加入全血或其他血液制剂流过柱子。目的细胞通过特异性的 Fab-Strep 作用从而结合到琼脂糖基质上,其他非目的细胞则有效的被洗去。最后,加入生物素使目的细胞从 Fab-Streps 上解离。至此,就已分离得到不带任何标记的、真实的目的细胞可用于下游的实验研究。 1. 实验流程 所需产品: CD3 Fab-TACS® Gravity Kit, human(IBA Lifesciences, Cat
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