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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
15℃-30℃
- 保质期:
2 4个月
- 英文名:
RIPA Lysis Buffered Solution(Strong) Without Inhibitor
- 库存:
1000
- 供应商:
赛尔沃德生命科学部
- 规格:
100ml
多种成分均可从细胞中提取总蛋白,如 Triton、SDS、NP-40 等。RIPA 裂解液(弱)是采用一种温和的裂解方法获得总蛋白的裂解液。所获得的蛋白质可用于PAGE 电泳、Western、免疫沉淀(Immunol Precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)等。
本品主要由 Tris、NP-40、sodium deoxycholate 等组成,并含有多种蛋白酶抑制剂成分,可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
规格: 100ml
有效期: 12个月
储存条件:0-4℃
运输条件:低温运输
定制服务:
本公司可以提供定制培养基服务,可以按照客户需求定制不同组分培养基,常规培养基所含组分浓度可以任意调节,可增加可去除,数量无限制。
购买说明:
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文献和实验1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitor(sigma cat no P8340) and 10μl phosphatase inhibitorRIPA buffer 最终浓度1M Tris-HCl pH7.5) 5 ml 50mMNaCl 0.87g 0.15 MNa-deoxycholale 0.1g (1%)0.5M EDTA(pH8.0) 0.8mlNaF 41 mgNonidet P40 1 ml (1%)Aprotinin
-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次(对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤)。 加入预冷的 RIPA 液(含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂),RIPA 液的用量:按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注:悬浮细胞,收集
,比如 RIPA,虽然裂解剧烈,但是无法维持蛋白天然构象,会破坏互作蛋白对。 如果自配,建议采用温和系统,比如 NP40/Triton 0.1%-1%;SDS ≤0.1%,盐离子≤150 mM 记得要加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂 结合液---利于蛋白之间的相互结合,要考虑孵育(结合)顺序 如果抗体和 beads 先孵育,建议 选择 pH 8.2(更常用)或者 pH 5.0 如果选用纯抗原作为诱饵蛋白 X 去拉裂解液中的靶蛋白 Y,抗体和抗原的结合 buffer 选择中性PBS/TBS 如果诱饵蛋白 X
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