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酵母双杂筛选抗体(酵母双杂交/
企业认证
南京瑞源生物
酵母双杂筛选抗体服务
▼ 技术简介
▼ 实验原理
1.首先构建酵母双杂交体系中的诱饵质粒pGBKT7-bait,将其转化到酵母菌株AH109内,在含有营养缺陷型的培养基中检测其自激活。
2.提取 bait 蛋白免疫的小鼠脾脏组织总RNA,反转录 PCR 和重叠 PCR 方法构建 VH -linker-VL 型 scFv 基因库。将其与载体 pGADT7 连接
3.pGADT7-scFV转化至含诱饵载体的AH109酵母菌中,于营养缺陷型平板中筛选阳性克隆。
4.成功筛选到抗诱饵的 scFv 片段,进行酵母分泌重组抗体表达
5.采用间接 ELISA 和免疫细胞化学等方法分析进行抗体的亲和特性测定
▼ 服务优势
▼ 应用前景
scFv具有分子质量小、穿透力将强、特异性较高等优点,在靶向治疗、影像诊断、细胞内免疫、生物检测等方面有着重要的应用。
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