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酵母单杂交建库及筛选服务(Ge
企业认证
南京瑞源生物
酵母单杂交建库及筛选服务
▼ 服务简介
酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等
▼ 应用领域
▼ 服务流程
▼ 样本要求
细胞样本:细胞数量大于1×10^7
动物样本:大于1 g
植物样本:大于2 g
总RNA:大于200 µg
▼ 服务内容
酵母文库构建
基本实验步骤
详细实验步骤
周期
交付材料
RNA提取
RNA提取 mRNA分离
5天
酵母单杂文库甘油菌1.5ml EP管(1管)
酵母单杂文库质粒1.5ml EP(1管)
Word文档电子版项目报告
cDNA文库构建
cDNA合成与接头连接(三框库)
cDNA按长度分离
均一化处理(可选)
重组到酵母单杂交载体pHis2上和电转化
文库检测和质粒提取
数据整理和分析
25天
酵母单杂交文库筛选
启动子背景筛查
Binding seq基因启动子的背景筛查
10天
阳性克隆测序结果
文库筛选
诱饵质粒转化和文库质粒转化
酵母筛选和3AT条件优化
筛选结果测序
30天
回转验证
筛选结果回转验证
阳性克隆酵母质粒
酵母单杂交一对一验证
阳性克隆酵母菌株
一对一验证
实验组:pHis-A+pGADT7-B
阳性对照 阴性对照
▼ 案例展示
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