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磷酸肽蛋白(肽段)提取试剂盒

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  • 逸微健华
  • EV01-05-01
  • 南京
  • 2026年01月09日
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      9999

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      5 mL

    由于磷酸化的化学计量比较低,因此磷酸肽的浓缩是成功进行磷酸蛋白质组学实验的关键步骤。PolyMAC提供了一种有效的、大大改进的方法来实现更完整的磷酸肽的富集化。这种高度选择性的富集法可以用于大多数复杂样品,因为它提供了最佳的专属性和回收率。PolyMAC是一种基于聚合物的固定化金属离子亲和捕获法,具有卓越的磷酸化蛋白质组覆盖率和回收率。它是一种可溶性纳米聚合物,设计用于与溶液中的磷肽相互作用,随后在固相载体上捕获,用于洗涤和磷肽洗脱。与常用的二氧化钛和固定化金属离子亲和捕捉法相比,PolyMAC具有更好的重现性和磷酸化肽段的富集性,磷酸化肽段的选择性接近95%,回收率>90 %。重要的是,对于总蛋白磷酸化水平较低的样品,PolyMAC具有非常好的回收率和选择性。

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    Iliuk A,Jayasundera K,Wang WH,Schluttenhofer R, Geahlen RL,Tao WA.(2015). In-Depth Analyses of B Cell Signaling Through Tandem Mass
    Spectrometry of Phosphopeptides Enriched by PolyMAC.Int J Mass Spectrom.2015 Feb 1;377:744-753.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25954137

    Searleman AC, Iliuk AB, Collier TS, Chodosh LA,Tao WA, Bose R.(2014).Tissue phosphoproteomics with PolyMAC identifies potential therapeutic targets in a transgenic mouse model of HER2 positive breast cancer. Electrophoresis.2014 Dec;35(24):3463-9. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24723360

    lliuk AB,Martin VA, Alicie BM, Geahlen RL and Tao WA(2010). In-depth analyses of kinase-dependent tyrosine phosphopro-teomes based on metal ion functionalized soluble nanopolymers. Mol.Cell. Proteomics. 9: 2162-2172, http:/www.nc-bi.nlm.nih.gov/pubmed/20562096 Original PolyMAC-Ti publication.
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      ,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

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