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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
28
- 英文名:
Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus(IHHNV)
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 传染性皮下和造血器官坏死病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3700 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Anti-GSK-3 Alpha /FITC 荧光素标记葡萄糖合成激酶-3α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | ADAM11: 去整合素样金属蛋白酶11抗体 0.2ml |
| Pumilio 1: PUM1蛋白抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh CCDC63 卷曲螺旋结构域蛋白63抗体 规格 0.2ml |
| Anti-CC16/FITC 荧光素标记克拉拉细胞蛋白(Clara细胞分泌蛋白)抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | PG(Human peptidoglycan) ELISA Kit 人肽聚糖 96T |
| EPHA7 Others Human 人 EPHA7 / EHK3 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-IRF-1/FITC 荧光素标记干扰素调节因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 人细胞裂解液 (阳性对照) | Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr228): 0酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体 0.1ml |
| 小鼠垂体瘤细胞;GT1-1 | Anti-P-CREB-1/FITC 荧光素标记0酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh Phospho-Tie2 (Ser1119) 0酸化血管生成素受体2抗体 规格 0.1ml | Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊肾蛋白2抗体Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
| Rhesus antibody Rh IgG/Bio 生物素标记的羊抗小鼠IgG 规格 0.1ml | HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| Resistin 抵抗素抗原 0.5mg | AsoFectagen?星形细胞转染试剂盒 |
| C: C抗体 0.2ml | 人肾上皮细胞完全培养基 100mL |
| GIRK3: G蛋白激活内向通道3抗体 0.1ml | CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| Anti-LRRC4 脑瘤相关基因抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 |
| F X (Mouse coagulation factor X ) ELISA Kit 小鼠凝血因子ⅩMulti-class antibodies规格: 48T | 传染性皮下和造血器官坏死病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒PRELP Others Human 人 PRELP 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Hepatitis B virus X protein: 乙型肝炎病毒X蛋白HBX抗体 0.1ml | 人近曲小管上皮细胞 英文名称: HK-2 |
| zinc finger protein 830: 锌指蛋白830抗体 0.2ml | 滑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)属细小病毒科,病毒粒子直径约20纳米,单链DNA,该病毒感染外胚层组织,如鳃、表皮、前后肠上皮细胞、神经索和神经节,以及中胚层器官,如造血组织、触角腺、性腺、淋巴器官、结缔组织和横纹肌,在宿主细胞核内形成包涵体。对虾传染性皮下及造血组织坏死病,又名慢性矮小残缺综合征(runt-deformity syndrome,RDS),1981年在美国
荧光定量PCR的应用 分子生物学研究1、核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等。2 、基因表达差异分析。 比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 ( 如药物处理、物理处理、化学处理等 ) ,特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证3 、SNP 检测。检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体
健康动物对各种刺激的耐受性一般比不健康、有病的动物要大,实验结果稳定,因此一定要选用健康动物进行实验,患有疾病或处于衰竭、饥饿、寒冷、炎热等条件下的动物,均会影响实验结果,选用的动物应没有该动物所特有的疾病,如小鼠的脱脚病(鼠痘)、病毒性肝炎和肺炎、伤寒;大鼠的沙门氏菌病、病毒性肺炎、化脓性中耳炎;豚鼠的维生素C缺乏症、传染性肺炎,沙门氏菌病;家兔的球虫病、巴氏杆菌病;狗的狂犬病、犬瘟热;猫的传染性白细胞减少症肺炎、猕猴的结核病,肺炎、痢疾等。常用实验动物的主要传染病的病原体、症状、病理所见
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