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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
46
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 猴源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4238 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品:
| 大鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA 试剂盒 96T/48T | Rabbit Anti-horse IgG/Bio 生物素标记的兔抗马IgG 0.1ml |
| 人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA 试剂盒 96T/48T | Rabbit Anti-Bovine IgM/Cy7 Cy7标记的兔抗IgM 0.1ml |
| 大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒 ,英文名: HA ELISA Kit | IFN- Alpha(Human Interferon Alpha) ELISA Kit 人α干扰素 96T |
| 兔子纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 试剂盒 96T/48T | NOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit 人合成酶 96T |
| 大鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒 ,英文名: ACA-IgA ELISA Kit | IASPP(inhibitory member of the ASPP family) 细胞凋亡ASPP家族的另一个成员(抗原) 0.5mg |
| 人杀伤细胞凝集素样受体(KLR)ELISA 试剂盒 96T/48T | Citrate buffer(1M pH6.0) 抗原热修复试剂(100×浓缩液) 60ml |
| 鸡热休克蛋白70(HSP-70)ELISA 试剂盒 96T/48T | sCD30L(Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand) ELISA Kit 小鼠可溶性CD30配体 96T |
| 小鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA 试剂盒 96T/48T | rec Protein A-Sepharose FF 重组蛋白A亲和层析柱 2ml柱床体积 |
| 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)ELISA试剂盒 96T/48T | PDGF-R-B 血小板源性生长因子受体-B(抗原) 0.5mg |
| 人抗流行性出血热病毒抗体IgM (EHF)ELISA 试剂盒 96T/48T | MUC5B(Human mucin-5 subtype B) ELISA kit 人粘蛋白/粘液素5B 96T |
| 大鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA 试剂盒 96T/48T | CD44 ELISA Kit 大鼠CD44分子 96T |
| 小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA 试剂盒 96T/48T | Shiga toxin II subunit B Kit E. coli 大肠杆菌 stx2B / Shiga toxin II subunit B ELISA配对抗体 ELISA |
| 大鼠前蛋白转化酶枯草溶菌素1(PCSK1)ELISA试剂盒 ,英文名: PCSK1 ELISA Kit | 猴源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒chloramphenicol/BSA 氯霉素偶联血清白蛋白 2mg |
| 人胰蛋白酶原Ⅱ(y-Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T | TPA ELISA Kit 大鼠组织多肽抗原 96T |
| 人Toll样受体4(TLR-4)ELISA试剂盒 96T/48T | LHRH(Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 人黄体生成素释放激素 96T |
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文献和实验如果您的样本是组织,取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的,组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用,RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻,之后转移至 -80℃ 长期保存,且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中,保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量,上样量过多,同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞,则样本搜集过程要简单的多了,只要保证细胞状态良好(细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解
标记(生物素、荧光、地高辛和Eu3+等)、引入与蛋白质结合的DNA序列、引入突变位点、插入与缺失突变序列和引入启动子序列等。 2 特定PCR的引物设计 在尽量遵循引物设计基本原则的同时,根据不同的实验目的,需要注意一些相应的事项,总结如下: 01 荧光定量PCR 荧光定量PCR有染料法和探针法两种。染料法只需要设计引物,而探针法除设计引物之外还得设计一条探针。 引物设计要尽量满足以下要求: 确保模板是cDNA
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
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