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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
A549
- 库存:
10
- 供应商:
研匠
- 细胞类型:
人非小细胞肺癌细胞
- 组织来源:
肺
- 相关疾病:
肺癌
- 物种来源:
人
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 器官来源:
肺
- 运输方式:
常温或干冰
- 年限:
2033
- 生长状态:
贴壁细胞
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
| 名称 | A549 [A-549] (人非小细胞肺癌细胞) (STR鉴定正确) |
| 别称 | A 549; A549; NCI-A549; A549/ATCC; A549 ATCC; A549ATCC; hA549 |
| 种属 | 人 |
| 年龄(性别) | 男;58岁 |
| 组织来源 | 肺癌 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 背景描述 | A549细胞是由D·J·Griad通过肺癌组织移植培养建系,源自于一位58岁白人男性;A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 生长培养基 | Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 倍增时间 | ~22 hours |
| 冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃ |
| 抗原表达情况 | The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. |
| 保藏机构 | ATCC; CCL-185 ATCC; CRM-CCL-185 ATCC; CRL-7909 BCRC; 60074 BCRJ; 0033 DSMZ; ACC-107 ECACC; 86012804 |
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文献和实验2: 个人认为很可能是操作过程中混入其它细胞所致,由于这两株细胞的形态差异较大,因此在没有十分严格的鉴定标准的情况下,建议采用两者方法: 1、重新获取细胞,复苏较早保存的细胞,或者从邻近实验室或者ATCC等细胞库购买低代次的A549。 2、传代是以1000-2000 cells/60mm dish的密度接种细胞,连续培养10
我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打细胞
我养了三种贴壁的细胞,用同样的消化方法,都很好。这三种细胞是A549,ECV304,2BS。1、0.25%胰酶新鲜解冻,不需要预热。2、倒掉培养瓶中的培养基,并用预冷的D-Hank‘s洗两次(要冷,用前4度中取出)。3、加入约1-2ml的胰酶,晃动瓶子,使液体浸润瓶底。4、超净台上放置约1-2分钟(2BS需要的时间更短,约1分钟)5、镜下观察(我一般都省略了,因为每次的效果都很好),见细胞变圆或细胞间隙变大,即可加入含血清的培养基终止消化。(我们的胰酶都不去掉)6、从瓶口到瓶底吹打,可见细胞
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