Equi-phi29 DNA Polymerase

商品属性：

产品名称	货号	规格	价格
Equi-phi29 DNA Polymerase	BJ-PJ6610	1000U	1170
Equi-phi29 DNA Polymerase	BJ-PJ6610	10KU	6240

描述：

描述：

Equi-phi29 DNA Polymerase 是 phi29 的改造体，并经多次纯化分离而得。在保留了 phi29 DNA 聚合酶的链置换、连续合成特性（>70kb）的基础上，提高了滚环扩增的反应温度，该酶酶可以在 42 度条件下持续的进行 DNA 合成（而 phi29 DNA 聚合酶在此温度下反应活性很低）。

这种高温的反应特性，在以下几个方面对实验有明显的提升：

（1）在 NGS 测序中，其提升了高 GC 含量、回文结构等复杂模板的延伸能力，使得 NGS 的覆盖度更均一，降低测序所需深度；

（2）高温的反应条件，提升了基因组 DNA的 WGA 产物的合成量，并可以进行变温扩增；

（3）降低测序中 Gap 区域，提升单细胞测序的数据质量和完整度；

（4）降低非特异性扩增产物；

（5）提升 MDA/RCA 等实验的扩增性能和特异性。
除此外，该酶仍然具有很强的 3’→5’外切酶校读功能，合成的 DNA 片段保真性高。该酶的外切酶活性较强，因此合成过程中引物需要 3’端硫代修饰，以降低外切活性对引物的切割效应。


储存：-20℃可保存 3 年。

注意：在不同的实验类型中，Oligo根据实验需要自行选择。
2. 引物和模板退火：体系配制完毕后，放置到 PCR 仪中，95℃ 3min，25℃ 3min。3. 退火完毕后，向退火产物中加入 1μl Equi-phi29 DNAPolymerase，混合均匀。
4. 扩增反应
4.1 恒温扩增
对于环状DNA模板采用恒温反应作为推荐使用30℃恒温扩增，30℃孵育 6~16h.该酶在 30-42℃条件下均可工作，
必要时根据实验类型进行调整。
4.2 变温扩增
对于基因组 DNA 或 cDNA 模板，推荐使用变温扩增反应，以在短时间内获得更高产量，并提高了低浓度模板的扩增产量。在 PCR 仪上做如下设置：
【30℃ 5min；42℃ 15s】循环 72 次（约 6h）或 120次（约 10h）.必要时，反应结束后，可于 65°C 10min 进行失活反应。
使用注意事项
（1）必要时可单独额外添加终浓度 1 mM DTT 和 0.2mg/ml BSA，可提高反应效率。
（2）该酶的最佳反应温度为 42 ℃ （在 30~42℃之间均有活性）。
（3）65℃ 10min 即可使该酶失活。
（4）根据实验类型需要，调整dNTP的浓度100~500 μM。
（5）添加 Yeast Pyrophosphatase可提高 DNA 产量。
（6）反应引物 3’端的硫代修饰可避免引物降解。

小鼠食管上皮细胞【Mouse Esophagus: Normal Esophageal Epithelial Cells】	人心室肌细胞完全培养基   100mL	AR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受体(多肽抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
人细胞;Hela S3 [HeLaS3]1-溴-4-十二烷基苯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)1-Bromo-4-dodecylbenzene	OP9   小鼠骨髓基质细胞	MECF(ouse eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒细胞趋化因子Multi-class antibodies规格： 48T
大鼠晶状体组织提取物【Eye: Normal Rat Lens Derivatives】	DLD-1   人结直肠腺癌上皮细胞   1ml/T75	HARS： 组酸tRNA连接酶抗体 0.2ml
HMy2.CIR 人 B 母细胞shēng huà shì jì容量：2～8℃1克	苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA检测试剂盒Bacillusthuringiensis,BTELISAKit 96T/48T	Anti-phospho-JAK2(Tyr1007+Tyr1008) 0酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
人皮肤MatchPair™:皮肤表皮角质形成细胞和肿瘤原代细胞【Human Skin MatchPair™: Normal Human Skin Epidermal Keratinocytes and Skin Carcinoma Cells】	293FT(人胚细胞)   5×106cells/瓶×2	CD34抗体 Anti-CD34 0.1ml
CL-0344HAN(人羊膜细胞)5×106cells/瓶×2叶绿素，英文名或英文缩写：Chlorophyll，级别：BR，85%，规格：10/支	HCT-15   人结直肠腺癌细胞	TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit 小鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1 96T
人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0氨基三乙酸（标准品）质量规格：供HPLC法杂质检查用Nitrilotriacetic acid	Equi-phi29 DNA Polymerase人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA检测试剂盒Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T	Rhesus antibody Rh TNIK TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗体 规格 0.2ml
PrimaCell™大鼠角膜成纤维细胞试剂盒	大鼠尿道上皮细胞培养试剂盒   大鼠尿道上皮细胞培养试剂盒   试剂盒	Rhesus antibody Rh NKG2D/CD314/KLRK1 NK细胞受体2D抗体 规格 0.1ml
MuM-2C细胞， 人眼脉络色素瘤细胞 赭绿青霉 小鼠成纤维细胞;φ2盐酸地布卡因-d9Dibucaine-d9 Hydrochloride	SHG-44   人胶质瘤细胞   1ml/T75	肽聚糖(PG)elisa试剂盒
A-375 [A375], 人恶性素瘤细胞株植物血凝素Phytohemagglutinin质量规格：BR	大鼠高密度脂蛋白3(HDL3)免疫试剂盒 Rat high density lipoprotein 3,HDL3 ELISA Kit	人基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒