- ￥1500
- 南京万木春
- 进口/国产
- 23XR015
- 2025年11月17日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SKBR3
- 库存：
现货库存
- 供应商：
南京万木春
- 肿瘤类型：
/
- 细胞类型：
细胞系
- 品系：
/
- 组织来源：
/
- 相关疾病：
/
- 物种来源：
/
- 免疫类型：
/
- 细胞形态：
/
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 器官来源：
人乳腺腺癌
- 运输方式：
常温/干冰
- 年限：
三代内
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
1×10^6/T25方瓶
1 、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出 T25 方瓶， 75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时， 以稳定细胞状态，然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液（备注： 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞， 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长，以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡） ，最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
2 、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液， 用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm/min，离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代， 最后放入 37℃ ,5%CO2 细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后， 观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3 、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm/min，离心 5min；
3）用适当量的冻存液（完全培养液： FBS：DMSO=7:2:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期储存（或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存）。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具） ，快速将其置入 37℃水浴中解冻， 直至冻存管中无结晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中，1000rpm 离心 5min ，然后加入 5ml 完全培养液混匀细胞， 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中， 放置于 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养；
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文献和实验wrwy 因实验急需MCF7,SKBR3乳腺癌细胞，哪位好心人能交换，本实验有T47D,231.293等细胞。谢谢。 msniu 我有MCF-7，站内联系 chenrongjun2011 本人在广州做实验，需要用到SKBR3，能否相赠一点，请加QQ1765730072或电话15915836004 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验
污染的报道越来越多。《The Scientist》期刊的 2008 年 9 月 16 日期发表了 Megan Scudellari 撰写的题为 A case of mistaken identity 的文章，文中指出现已发表的 650 多项研究中所用的乳腺癌细胞可能并不是真正的乳腺癌细胞。 《Nature》于 2009 年发表了一篇以 Identity crisis 为题的社论文章，发表了一株细胞系约 18%-36% 的污染事件。时至今日，遭污染的细胞系已经进入上千家实验室，并且多家实验室发表
；（2） ALKBH5介导了（1）: RT-qPCR，WB;3. ALKBH5通过去甲基化，加强了 NANGO mRNA的稳定性（1） ALKBH5介导了缺氧对NANOG的m6A修饰：m6A免疫共沉淀，RT-qPCR；（2） NANOG的m6A修饰影响了mRNA的稳定性：Flavopiridol处理，RT-qPCR；（3） NANOG的m6A修饰位点确认：点突变，荧光素酶报告基因4. ALKBH5介导了缺氧对BCSC的促进作用（1） ALKBH5介导了缺氧对乳腺癌细胞成球能力的促进
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