细胞永生化构建方法:(1)大多数体细胞的端粒缩短至关键长度就会发生细胞生长障碍或细胞衰
老。人类催化亚基端粒酶逆转录酶 ( human telomerase reverse transcriptase , hTERT) 是端粒酶的限速成分 ,
仅在端粒酶阳性的细胞中表达 ,与端粒酶活性相关。研究发现,hTERT 共转染 P53 或 pRB siRNA 可以使
人类原代细胞永生化。(2)使用 SV40T 基因诱导细胞不朽化。SV40 的 T 抗原诱导不同类型的细胞不朽
化,在许多文献中己证实,其机制一直都有详细记载。(3)HPV 已成功将人的包皮细胞、角化上皮以及
乳腺、胰导管和口腔等的上皮细胞永生化。HPV 的早期表达蛋白 E6 和 E7 在细胞永生化中起决定性作用。
E6 和 E7 蛋白能够改变细胞的终末分化,诱导细胞进入 S 期,使细胞绕过正常细胞的周期检查点。