- ￥2500
- 南京万木春
- 进口/国产
- 23XR080
- 2026年01月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
MAVOS
- 库存：
现货库存
- 供应商：
南京万木春
- 肿瘤类型：
/
- 细胞类型：
细胞系
- 品系：
/
- 组织来源：
/
- 相关疾病：
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- 物种来源：
/
- 免疫类型：
/
- 细胞形态：
/
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 器官来源：
小鼠主动脉平滑肌
- 运输方式：
常温/干冰
- 年限：
三代内
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
1×10^6/T25方瓶
1 、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出 T25 方瓶， 75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时， 以稳定细胞状态，然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液（备注： 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞， 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长，以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡） ，最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
2 、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液， 用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm/min，离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代， 最后放入 37℃ ,5%CO2 细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后， 观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3 、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm/min，离心 5min；
3）用适当量的冻存液（完全培养液： FBS：DMSO=7:2:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期储存（或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存）。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具） ，快速将其置入 37℃水浴中解冻， 直至冻存管中无结晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中，1000rpm 离心 5min ，然后加入 5ml 完全培养液混匀细胞， 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中， 放置于 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养；
3）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验Perfusion Kit, mouse and rat，130-128-030） 搭配gentleMACS Octo八通道带加热全自动组织解离器使用。 7. 如何得到心肌细胞？ 小鼠心脏由多种类型细胞构成，包括心肌细胞、成纤维细胞、内皮细胞、免疫细胞、平滑肌细胞等。其中心肌细胞通过闰盘紧密连接，需要较强的酶解，但细胞膜脆弱，很容易在解离过程中破裂而造成细胞死亡。尤其是成年小鼠心肌细胞，体积大且不规则，更加大分离难度。 对于新生小鼠，闰盘未完全成熟，细胞连接没有十分紧密，可以使用常规解离方法，但可能出现得率
消化。实验中还应根据传代后死细胞多少而做适当调整。作者通过对大鼠主动脉平滑肌细胞培养的长期摸索与实践，优化培养方法，使组织贴块法更经济实用，为研究提供大量遗传性质均一、功能状态良好的细胞。 第一次传代时机 一般的培养方法是选取细胞达亚融合状态时进行传代[1~3]。但贴块法原代培养时细胞生长往往不均匀，经常是一些区域已长成致密细胞层，一些区域仍未见细胞生长，这种情况下，当整瓶细胞达亚融合时，致密细胞层已老化。作者通过摸索，认为当原代培养5~7 d后可移出孵箱观察，如培养液变黄可部分换药继续培养，每隔
Ⅰ与IL-1结合。IL-1与IL-RtⅠ结合后即发生内化（internalization)。成纤维细胞、平滑肌细胞主要表达IL-1RtⅠ。一般来说，IL-1RtⅠ可与IL-1α和IL-1β相结合，但IL-1α与Ⅰ型受体结合能力较高，而IL-1β与Ⅱ型受体结合较高。IL-1与不同种属不同细胞结合后的生物学效应有所差别，如人和鼠IL-1α结合到人内皮细胞上的亲和力相同，但产生的生物学效应不完全相同。抗IL-1RtⅠMcAb在体内和体外均可抑制IL-1在生物学效应。 （2）IL-1RtⅡ：主要
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