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上海研匠生物科技有限公司
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细胞粘附实验
一、技术简介
本实验主要用于判定细胞在经过各种药物处理、基因转染、敲除或培养条件改变后,细胞的粘附能力改变情况。通常可分为两类,即细胞与细胞黏附和细胞与基质黏附。细胞黏附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力,提示这些细胞在相互识别及黏附机制方面发生了改变。
二、实验流程
1. 用无血清培养基RPMI-1640将Matrigel(人工基底膜胶)配制成0.04μg/μl的人工基底膜胶备用,96孔板每孔中铺Matrigel 2μg,放于超净台中风干过夜。
2. 在96孔板加入适量无血清RPMI-1640细胞培养液(或PBS或生理盐水),放置60-90分钟。3. 洗去多余的胶,取培养的肿瘤细胞以1×104/孔接种在铺胶的96孔板中,设3个重复孔,放入37摄氏度5%CO2培养箱中培养24h。
4. 加药和模型药,培养48h。
5. MTT检测:吸掉液体,然后每孔加入MTT 10μl,继续培养4h,吸掉液体,每孔加入二甲基亚砜(DMSO)100μl,在振荡器上振荡5-10分钟,在显微镜下观察无晶体,然后在酶标仪490nm波长读取数值。
三、交付结果及展示

细胞粘附结果示例
本实验主要用于判定细胞在经过各种药物处理、基因转染、敲除或培养条件改变后,细胞的粘附能力改变情况。通常可分为两类,即细胞与细胞黏附和细胞与基质黏附。细胞黏附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力,提示这些细胞在相互识别及黏附机制方面发生了改变。
二、实验流程
1. 用无血清培养基RPMI-1640将Matrigel(人工基底膜胶)配制成0.04μg/μl的人工基底膜胶备用,96孔板每孔中铺Matrigel 2μg,放于超净台中风干过夜。
2. 在96孔板加入适量无血清RPMI-1640细胞培养液(或PBS或生理盐水),放置60-90分钟。3. 洗去多余的胶,取培养的肿瘤细胞以1×104/孔接种在铺胶的96孔板中,设3个重复孔,放入37摄氏度5%CO2培养箱中培养24h。
4. 加药和模型药,培养48h。
5. MTT检测:吸掉液体,然后每孔加入MTT 10μl,继续培养4h,吸掉液体,每孔加入二甲基亚砜(DMSO)100μl,在振荡器上振荡5-10分钟,在显微镜下观察无晶体,然后在酶标仪490nm波长读取数值。
三、交付结果及展示
| 结题报告 | |
| 交付结果 | 基本实验步骤、细胞粘附图片、MTT或CCK-8检测结果 |

细胞粘附结果示例
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