Thermo Scientific23230Pierce B

蛋白质的定量测定方法：二喹啉甲酸法(BCA法)

试剂的配制 ① 试剂A，1L：分别称取10g BCA (1%)，20g Na 2 CO 3 ·H 2 O (2%)，1.6g Na 2 C 4 H 4 O 6 ·2H 2 O(0.16%)，4g NaOH (0.4%) ，9.5g NaHCO 3 (0.95) ，加水至1L，用NaOH或固体NaHCO 3 调节pH值至11.25

蛋白质免疫检测技术服务

。 3、如果客户提供裂解的样品，样品的裂解液需包含蛋白酶抑制剂，并且加入上样缓冲液煮沸5分钟后，再用泡沫盒加冰袋寄送，如此可保证样品不产生降解。 4、如果客户提供未裂解的组织样品，需要用干冰加厚泡沫盒，超低温寄送。 5、结果：western blot机以全自动的方式模拟客户的手工western blot操作，并配置了800万超高像素的制冷CCD进行信号捕获，配套了灵敏度高于thermo最高品质发光液4倍的超敏ECL发光液进行信号释放，western blot机还配套了低背景封闭及抗体增敏稀释液，膜上抗体

做好 Western Blot，这几个操作技巧很关键

期保存，注意不要反复冻融，因为会使蛋白的抗原特性发生改变。> 切莫使用不新鲜的上样缓冲液，同时在处理时应注意将样品与 loading buffer 混合均匀。二、蛋白质定量：> 如果要定量的话，一般选择 BCA 或者 Bradford 方法，BCA 要求检测波长为 562nm，Bradford 为 595nm。具体方法见各试剂盒说明书。为避免假阳性结果，建议先把 lysis buffer 加入 BCA 工作液或考马 G250 混合看是否产生颜色。> 按分子克隆的说法，还是使用等体积上样比较好。上样总体