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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
44
- 英文名:
SK-CO-1
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| SK-CO-1细胞 | T25瓶 | LZ-X968829 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| PrimaCell™人卵巢癌组织源细胞试剂盒 | 杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6雌激素酮 β-D-葡萄糖苷酸钠盐Estrone β-D-Glucuronide Salt |
| PrimaCell™人肾癌成纤维细胞试剂盒 | CL-0214SK-N-SH(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2拓扑替康羧酸钠盐Topotecan Carboxylic Acid Salt |
| 大鼠脑胶质瘤细胞;C6SDS(wo7iumDODECYLSULFATE),10%SOLUTIONSDS溶液超级透明无色液体RTsigma | NCI-H446 人小细胞肺癌细胞TSTU N,N,N',N'-Tetramethyl-O-(N-succinimidy... 105832-38-0 1G 染色剂 |
| 人支气管上皮细胞提取物【Human Lung: Normal Bronchial Epithelial Cell Derivatives】 | HUVEC pre-screened Pellet 人脐静脉内皮细胞(预选型) > 1 mio.cells 角质细胞培养基KM-acf没食子酸一水物质量规格:>98%,ARGallic acid monohydrate |
| 猪肾细胞;PK(15)2-脱氧-D-葡萄糖质量规格:>98%,BR2-Deoxy-D-glucose | 人心脏微血管内皮细胞RNAHCMEC miRNA5 μg氯磺隆Chlorosulfuron质量规格:>93%,BR |
| 小鼠膀胱组织提取物【Bladder: Normal Mouse Bladder Derivatives】 | CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-甲基咪唑(>98%,BR)质量规格:>98%,BR1-Methylimidazole |
| IGFBP6 Others Human 人 IGFBP6 / IBP-6 人细胞裂解液 (阳性对照) 六拂鳞醋 Hqxcfluorophosphoric ccid; | 兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE)核糖核酸酶A(sigma)Ribonuclease A from bovine pancreas质量规格:≥50 U/mg,sigma 原装 |
| 大鼠输尿管上皮细胞提取物【Rat Ureter: Normal Ureter Derivatives】 | 胰腺星状细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)依泽替米贝羟基β-D-葡萄糖苷酸 Ezetimibe Hydroxy β-D-Glucuronide |
| CL-0401NCI-H446(人小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×214936-97-1蓝I钠盐XYLIDYL BLUE I wo7ium SALT | CFD Others Mouse 小鼠 CFD / Adipsin 人细胞裂解液 (阳性对照) 吡喹酮Praziquantel质量规格:>98.5%,BR |
| A2780人卵巢癌细胞 | ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人细胞裂解液 (阳性对照) 依他尼酸(标准品)质量规格:供检查用Ethacrynic acid |
| FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-戊苯(>90.0%(GC))质量规格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-pentylbenzene | CKMT1A Others Human 人 CKMT1A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (S型)人参皂苷Rh2(标准品)Ginsenoside Rh2质量规格:HPLC≥98%,标准品 |
| CHOdhfr细胞,二氢叶酸缺陷型中国仓鼠卵巢细胞 人癌细胞系,1590细胞 人星形胶质细胞裂解物HAL正(Standard for GC,>99.5%(GC))1-Hexanol质量规格:Standard for GC,>99.5%(GC) | 人血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1酶联免疫试剂盒 |
| SK-CO-1细胞人胚肺二倍体细胞;HL 人小肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL氘代苯-D6(10g )Benzene-D6质量规格:D,99.5%+0.03%TMS | 人母亲DPP同源物4酶联免疫试剂盒 |
| SHZ-88大鼠癌细胞 Breast cancer cells of SHZ-88 rats DMEM培养基+10%FBS典化铵;典化铔 cMMoniuM iodidq 107-06-4 | 人黑色素浓缩激素酶联免疫试剂盒 |
| 人肝脏间充质干细胞HMSC-hp半乳糖(标准品)D-GALACTOSE 1-[2-(2-AZHOXY)ETHOXYETHYL]-2,3,4,6-TETRA-O-ACETATE质量规格:供检查用 | 人Toll作用蛋白酶联免疫试剂盒 |
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文献和实验1. Inoculate the entire colony in 5 ml YPD culture O.N. or 12 hours 2. Dilute into YPA medium (1% yeast extract, 2% Bacto-peptone, 2%KOAC) to OD600~ 0.2, Vigorous shaking. 3. For ts mutants, ~15hours at 23C, others ~10 hours at 30C
适用标准:GB/T3536-91(克力夫兰开口杯法)GB/T267-88 产品说明: 本仪器采用当代先进技术,集机械、光学,电子及计算机技术于一体,结构紧凑。可自动完成石油产品开口闪点的测试,实验过程中的升温速率及扫描点火动作由微机控制自动进行,油气闪火时,检测系统自动捕捉并记录闪点温度。对闪点数据进行自动气压修正,并以规范的格式打印输出,还可根据需要重复打印数据。 本仪器可由计算机监控(无线/有线通讯方式,由用户选配)。 本仪器结构合理,性能稳定,操作简单,是理想的分析
刚开始养SK-BR-3时,细胞状态不是很好,贴壁也不均匀,于是开始想办法,考虑是不是吹打的不够,或是传得过多,或是其它的什么,后来发现的确如此,细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。我的传代方法是:以50平方厘米培养瓶为例,待细胞长满瓶底70%-80%1 、吸除或倒掉瓶内旧培养基。2 、PBS 5ml加入培养瓶,轻轻晃动培养瓶,让PBS流遍细胞表面,倒掉。3 、PBS 5ml加入培养瓶重复洗一次,倒掉。4 、加入1ml胰蛋白酶消化液,轻轻摇动培养瓶,使消化液流遍所有细胞表面,然后置37度
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