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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
51
- 英文名:
Jurkat
- 生长状态:
悬浮生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| Jurkat细胞 | T25瓶 | LZ-X969171 |
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶
5) 用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| FibrOut™人皮肤成纤维抑制剂 Human FibrOut™ 6, for skin | PK15-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)猪肾上皮细胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin莱苞迪甙A质量规格:>98%,BRRebaudioside A |
| FibrOut™大鼠脂肪/眼/肺/乳腺成纤维抑制剂 Rat FibrOut™ 1, for adipose, fat, eye, lung | TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 洛索洛芬钠(标准品)质量规格:含量测定Loxoprofen |
| CD7 Others Human 人 CD7 人细胞裂解液 (阳性对照) TBE,5XLIQUIDCONCENTRATE5X TBE 浓缩液超级4LRT | 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1O-去甲基霉酚酸O-Desmethyl Mycophenolic Acid |
| 大鼠小脑颗粒细胞提取物【Rat Brain: Normal Cerebellar Granule Cells Derivatives】 | LIFR Others Human 人 LIFR / CD118 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,4-二氨基-6-异丙氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))质量规格:>98.0%(T)2,4-Diamino-6-isopropoxy-1,3,5-triazine |
| NAMALWA细胞,Butt's 瘤细胞 细胞,KB-C1.5细胞 EB病毒转化的人B细胞;KMY0903200ul盒装吸头100U保存:-20℃ | 人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 )尿胰蛋白酶抑制剂Urinary trypsin inhibitor fragment质量规格:>95% (HPLC),BC |
| 人膀胱成纤维细胞【Human Bladder:Normal Bladder Fibroblasts】 | OS-732细胞,骨肉瘤细胞(瘤株) 人细胞,SiHa细胞 人脊髓星形胶质细胞总RNAHA-sp NA3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇(标准品)质量规格:含量测定3,29-Dibenzoyl rarounitriol |
| 人脐动脉平滑肌细胞RNAHUASMC miRNA5 μg血清兔抗小鼠IgGshēng huà shì jì容量:RT1块 | CD3D Others Mouse 小鼠 CD3d / CD3 delta 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲基泼尼龙Methylprednisolone质量规格:>97%,BR,可用于细胞培养 |
| Primarker™大鼠内脏脂肪细胞鉴定试剂盒 | IL1RN Protein Human 重组人 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签)甘氨酸-L-亮氨酸 质量规格:0.98Glycyl-L-leucine |
| EMT-6 小鼠癌3182-93-2L-本酸乙酯盐酸盐etxyl L-pxenylalaninate xy7nochloride | 小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-14'-羟基托莫西汀β-D-葡萄糖苷酸4'-Hydroxy Atomoxetine β-D-Glucuronide |
| 人正常前列腺基质永生化细胞;WPMY-1阿替洛尔酸Metoprolol Acid | 人小脑颗粒细胞提取物 |
| VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 人细胞裂解液 (阳性对照) 流吩嗪(-20℃) 5-Mqthylphqnczinium mqthosulfctq 1999/11/6 | 人腹膜毛细血管组织提取物 |
| CD63 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照) 异甘草素(标准品)Isoliquiritigenin质量规格:HPLC≥98%,标准品 | 人胎儿血红蛋白酶联免疫试剂盒 |
| Jurkat细胞COS-6细胞,非洲绿猴肾细胞 A375(人类恶性色素瘤) 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1芹菜苷; 芹黄苷Apiin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 | 人抗 |
| 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1 胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解缓冲液) 1mL3-(录磺酰)本加醋,97% 3-(Chlorosulfonyl)bqnzoic ccid 402-64-3 | 人蛋白酶3酶联免疫试剂盒 |
| FGF6 Protein Human 重组人 FGF6 / FGF-6 蛋白5-甲酰水杨酸5-Formylsalicylic acid质量规格:>97% | 人25羟基维生素D2酶联免疫试剂盒 |
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文献和实验Jurkat细胞(人外周血白血病T细胞),是一种悬浮细胞。我的经验如下:1、培养液:RPMI1640,15%小牛血清,2%Na2CO3,1%HEPES,青霉素100IU/1ml,庆大霉素100IU/ml;2、培养条件:5%CO2,37度,30%湿度;3、细胞复苏:要快速将冻存管放入37度水中,不断轻轻摇晃,直到细胞完全溶解,加入10ml左右的培养液,800~1000rpm,10分钟离心,之后倒掉液体,加入新的培养基就可以进行培养了;4、细胞培养:起初进行传代时由于细胞刚刚复苏,长得比较
示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
强度,然后对模板的浓度作图。因为内参照与特异的mRNA在同一体系中的共同扩增效率在PCR对数期内是相同的,因此,可用标准曲线对特异mRNA进行定量。现以质粒AW108cRNA为内参对照来确定Jurkat细胞诱导产生的IL-2 mRNA量为例。 材料与试剂 1. RNA提取所需试剂与材料 2. MMLV逆转录酶 3. 32 P末端标记引物(IL-2引物序列见第九章,放射性标记见第四章相应内容) 4. dNTP,Tag DNA
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