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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
辉骏生物
- 库存:
1000
- 检测范围:
12次/24次
- 规格:
具体价格请联系辉骏生物:4006991663
| 产品名 | 货号 | 规格 | 货期 |
| ChIP试剂盒(Protein G 树脂) | FI8902 | 12次/24次 | 现货 |
| ChIP试剂盒(Protein A/G 磁珠) | FI8903 | 12次/24次 | 现货 |
| ChainFree® FLAG-Tag ChIP试剂盒 | FI8904 | 12次/24次 | 现货 |
| ChainFree® GFP-Tag ChIP试剂盒 | FI8907 | 12次/24次 | 现货 |
| ChainFree® mCherry-Tag ChIP试剂盒 | FI8908 | 12次/24次 | 现货 |
染色质免疫共沉淀试剂盒(ChIP试剂盒)产品简介
染色质免疫共沉淀ChIP是研究体内DNA与蛋白质结合的技术。先用甲醛交联细胞内的“蛋白-DNA”复合物,裂解细胞后,用超声波破碎DNA至适合的长度,采用特异性抗体beads捕获细胞内的“诱饵蛋白-结合DNA” 复合体,随后将蛋白与DNA解交联,提取结合的DNA。该DNA可用于后续的定量PCR检测(qPCR)或高通量测序(seq)。
根据诱饵蛋白是否携带标签,以及beads类型不同,辉骏生物公司开发了多款ChIP试剂盒,可用于在不同情况下调取目标蛋白及其结合的DNA片段。
当诱饵蛋白不带标签时,可以根据beads的不同选择protein G 或Protein A/G ChIP试剂盒,当诱饵蛋白携带标签时,可以根据标签种类的不同选择ChainFreeTM 系列试剂盒,该系列试剂盒采用了优化并重组表达的、无轻重链的标签抗体磁珠进行ChIP实验。IP复合物无论采用非变性洗脱还是变性洗脱,均不会出现抗体的轻、重链污染问题。
chip检测试剂盒产品应用
基因表达是一个复杂、调控有序的过程,DNA与蛋白质的相互作用是基因转录起始和调控的关键。ChIP(染色质免疫共沉淀)是检测体内条件下DNA与蛋白质相互作用的方法,用于验证或寻找与已知蛋白结合的DNA序列。以下列举了可应用ChIP试剂盒的几个研究方向:
1、组蛋白修饰(如磷酸化、乙酰化、甲基化等)与基因表达的关系研究 2、转录调控因子与DNA的作用研究 3、 DNA甲基化调控研究
chip染色质免疫共沉淀试剂盒组分
| 试剂名称 | 体积(12 Tests) | 体积(24 Tests) | 保存条件 |
| Protein G或Protein A/G beads | 500 μL | 1 mL | 4 ℃,1年 |
| 裂解缓冲液 | 7 mL | 14 mL | 4 ℃,1年 |
| 漂洗液 | 25 mL | 50 mL | 4 ℃,1年 |
| 洗脱缓冲液 | 400 μL | 800 μL | 4 ℃,1年 |
| 10xTE缓冲液 | 550 μL | 1.1 mL | 4 ℃,1年 |
| NaCl | 260 μL | 520 μL | 4 ℃,1年 |
| Proteinase K | 130 μL | 260 μL | -20 ℃,1年 |
| RNaseA | 130 μL | 260 μL | -20 ℃,1年 |
| 蛋白酶抑制剂 | 190 μL | 380 μL | -20 ℃,1年 |
ChIP试剂盒—辉骏生物产品优势
1. 优化的proteinG或proteinA/G beads与抗体亲和效率高,抗体用量少。
2. 操作简便,周期短,适合初学者。
3. 品质好,实验结果稳定。
4. 适配后续qPCR和高通量测序实验。
chip试剂盒使用案例
实验目标:检测诱饵蛋白(A)和待测DNA序列(B)的结合。

图一:诱饵蛋白的western-blot检测图
| Normalized to Input | B基因-引物1 | B基因-引物2 |
|---|---|---|
| Input | 1 | 1 |
| IgG_ChIP | 0.01% | 0.01% |
| Anti-A_ChIP | 0.44% | 0.23% |
| Normalized to IgG | B基因-引物1 | B基因-引物2 |
| IgG_ChIP | 1 | 1 |
| Anti-A_ChIP | 59.19 | 50.80 |
ChIP-qPCR结果统计表

图二:ChIP-qPCR结果统计图
ChainFree® chip试剂盒组分
| 试剂名称 | 体积(12 Tests) | 体积(24 Tests) | 保存条件 |
| ChainFree® 标签抗体磁珠 | 250 μL | 500 μL | 4 ℃,1年 |
| 裂解缓冲液 | 7 mL | 14 mL | 4 ℃,1年 |
| 漂洗液 | 25 mL | 50 mL | 4 ℃,1年 |
| 洗脱缓冲液 | 400 μL | 800 μL | 4 ℃,1年 |
| 10xTE缓冲液 | 550 μL | 1.1 mL | 4 ℃,1年 |
| NaCl | 260 μL | 520 μL | 4 ℃,1年 |
| Proteinase K | 130 μL | 260 μL | -20 ℃,1年 |
| RNaseA | 130 μL | 260 μL | -20 ℃,1年 |
| 蛋白酶抑制剂 | 190 μL | 380 μL | -20 ℃,1年 |
ChainFree®系列ChIP试剂盒-辉骏生物产品优势
1、无抗体轻重链污染:IP复合物无论采用非变性洗脱还是变性洗脱,均不会出现抗体的轻、重链污染问题。
2、亲和力强:低nM级别亲和力,轻松应对低拷贝基因,或难转染细胞系。
3、特异性强:抗体磁珠通过了20株以上的空白细胞系检测,不易产生非特异吸附。
4、结合量高:每10 µL抗体磁珠可结合约15 µg重组蛋白。
5、兼容性好:无论标签在诱饵蛋白的N端或C端,都能识别。
6、稳定性好:通过了45℃高温测试。
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文献和实验1. Zhuang Q. et al: NCoR/SMRT co-repressors cooperate with c-MYC to create an epigenetic barrier to somatic cell reprogramming. Nature Cell Biology. 2018. IF=28.213.
2. Chen R. et al: Lnc-GD2H Promotes Proliferation by Forming a Feedback Loop With c-Myc and Enhances Differentiation Through Interacting With NACA to Upregulate Myog in C2C12 Myoblasts. Front Cell Dev Biol. 2021. IF=6.684.
染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)是一种用于研究目的蛋白在染色质上定位的技术。ChIP 的原理是通过甲醛处理细胞固定 DNA 和蛋白,然后提取染色质,使用超声或酶解将染色质剪切成小片段。 之后使用结合在染色质的目的蛋白或组蛋白修饰特异性抗体富集 DNA 片段。富集的 DNA 片段可以通过 PCR,DNA 芯片或测序进行分析。虽然原理看起来很简单,但 ChIP 是一项非常具有挑战的技术,很多因素都可能导致实验
相互作用极少发生或不稳定时,这些变量就更为关键。 第 1 步 – 采用对照(实验严谨更可靠) 虽然使用酶消化制备染色质,可以改善 ChIP 操作规程,但合理的对照和高度特异性的抗体也同样重要。在实验操作步骤中添加阳性和阴性对照抗体可确保分析正常进行且结果可靠。 阳性对照 许多市售的试剂盒附带 Rpb1(RNA 聚合酶 II 的最大亚基)的抗体,做为阳性对照抗体。但是,Rpb1 仅在活性转录位点结合,因此,如果要研究的位点是非活性位点,那么 Rpb1
方便,不像Agarose beads那样容易破裂,所以在操作过程中更简单,而且免去了离心的步骤,节省不少时间。Millipore公司最新推出的Magna ChIP试剂盒就是采用这种Magna beads。 抗体选择: 染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是ChIP实验成功的关键。因为在蛋白质与染色质交联结合时,抗体的抗原表位可能因为与结合位点的距离太近,不能被抗体识别,所以不能有效地在体内形成免疫沉淀复合物,直接影响ChIP的结果。所以不是所有的抗体都能做ChIP实验的,只有经过ChIP实验验证
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