丙tong酸脱羧酶(PDC)试剂盒产品图

丙tong酸脱羧酶(PDC)试剂盒

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  • ￥790
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  • WS5380F
  • 国内
  • 2026年09月29日
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    • 英文名：

      Pyruvate Decarboxylase (PDC) Kit

    • CAS号：

      WS5380F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    丙*酸脱羧酶（pyruvate decarboxylase,PDC）活性测定试剂盒说明书
    （货号：WS5380F 分光法 48 样）
    一、产品简介：
    丙*酸脱羧酶（PDC，EC4.1.1.1）。是乙醇发酵的关键酶之一，催化*酮酸脱羧生成
    乙醛，存在于酵母和植物体中。
    PDC 催化*酮酸脱羧生成乙醛，乙醇脱氢酶进一步催化 NADH 还原乙醛生成乙醇和
    NAD+；通过测定 NADH 在 340 nm 处的光吸收下降速率，即可得到 PDC 酶活性大小。
    二、试剂盒的组成和配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 60mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    液体 32mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂二
    粉体 mg×1 支
    4℃保存
    用前甩几下使试剂落入底部，再
    加 2.1mL 蒸馏水混匀备用。
    试剂三
    粉体 mg×2 支
    -20℃保存
    用前甩几下使试剂落入底部，每
    支加 1.1mL 蒸馏水混匀备用，用
    不完的试剂分装后-20℃保存，禁
    止反复冻融，三天内用完。
    试剂四
    液体μL×1 支
    -20℃保存
    用前甩几下使试剂落入底部，再
    加 2.1mL 蒸馏水混匀备用。
    三、所需的仪器和用品：
    紫外分光光度计、1mL 石英比色皿（光径 1cm）、水浴锅、台式离心机、可调式移
    液器、研钵、冰和蒸馏水。
    四、丙*酸脱羧酶（PDC）活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    ① 组织样本：
    称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。12000grrpm，4℃离心 10min，
    取上清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取。
    ② 细菌/细胞样本：
    先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液；
    冰浴超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
    12000rpm，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104个）：提取液（mL）为 1:1000~5000 比例进行提取。
    2、上机检测：
    ① 紫外分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。
    ② 所有试剂解冻至室温（25℃）。
    ② 依次在 1mL 石英比色皿中加入：
    试剂名称（μL）
    测定管
    样本
    40
    试剂一
    640本试剂盒仅供科研使用
    2
    试剂二
    40
    试剂三
    40
    试剂四
    40
    混匀，30℃条件下，10S时于340nm处读取A1，10min
    后读取 A2。△A= A1-A2。
    【注】1.若△A 的值在零附近，可以适当延长反应时间到 30min 或更长读取 A2，改变后的反应时间
    需代入计算公式重新计算。或适当加大样本量，则改变后的加样体积需代入计算公式
    重新计算。
    2. 若起始值 A 太大如超过 2（如颜色较深的植物叶片，一般色素较高，则起始值相对会偏
    高），可以适当减少样本加样量，则改变后的加样体积需代入计算公式重新计算。
    或向待测样本中加少许活性炭混匀静置 5min 后 12000rpm, 4℃离心 10min，上清液用于
    检测；
    3. 若下降趋势不稳定，可以每隔 10S 读取一次吸光值，选取一段线性下降的时间段来参
    与计算，相对应的 A 值也代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、按照蛋白浓度计算
    酶活定义：30℃条件下，每毫克蛋白每分钟氧化 1nmol NADH 为 1 个酶活单位。
    PDC (nmol/min/mg prot) =[△A÷ε÷d×V2×109]÷(Cpr×V1) ÷T
    =321.5×△A÷Cpr
    2、按照样本质量计算
    酶活定义：30℃条件下，每克组织每分钟氧化 1nmol NADH 为 1 个酶活单位。
    PDC (nmol/min /g 鲜重) =[△A÷ε÷d×V2×109]÷(W×V1÷V) ÷T
    =321.5×△A÷W
    3、按细胞数量计算
    酶活定义：30℃条件下，每 104个细胞每分钟氧化 1nmol NADH 为 1 个酶活单位。
    PDC (nmol/min/104cell) =[△A÷ε÷d×V2×109]÷(细胞数量×V1÷V) ÷T
    =321.5×△A÷细胞数量
    4、按液体体积计算
    酶活定义：30℃条件下，每毫升液体每分钟氧化 1nmol NADH 为 1 个酶活单位。
    PDC (nmol/min /mL) =[△A÷ε÷d×V2×109]÷V1÷T
    =321.5×△A
    ε---NADH 摩尔消光系数，6.22×103L/mol/cm；
    d---比色皿光径，1cm；
    V：加入提取液体积，1mL；
    V1---反应体系中上清液体积，0.04mL；
    V2---反应体系总体积，0.8mL=8×10-4 L，
    W---样本质量，g ；
    T：反应时间，10 min；
    细胞数量：500 万；
    Cpr：蛋白浓度（mg/mL），建议使用本公司 BCA 蛋白质含量试剂盒。

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