糖原合成酶(GCS)试剂盒产品图

糖原合成酶(GCS)试剂盒

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  • ￥1040
  • wksubio
  • WS2650F
  • 国内
  • 2026年10月09日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 库存：

      大量

    • 英文名：

      Glycogen Synthase (GCS) Kit

    • CAS号：

      WS2650F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    糖原合酶（Glycogen synthase，GCS）试剂盒说明书
    （货号：WS2650F 紫外分光法 48 样）
    一、产品简介：
    糖原合酶（GCS，EC 2.4.1.11）将 UDP-G 糖基加到葡萄糖残基上，以α-1，4-糖苷键相
    连延长糖链，GCS 是糖原合成的限速酶，对糖代谢和血糖稳态的维持具有重要作用。
    GCS催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UDP，*酮酸激酶和乳酸脱氢酶的逐一作用
    下，使NADH氧化为NAD+，通过检测NADH在340nm处的下降量来计算GCS酶活大小。
    二、试剂盒组成和配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 60mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    粉剂 mg×1 支
    -20℃保存
    临用前甩几下使粉剂落入底部，再加
    2.5mL 蒸馏水充分溶解备用。
    试剂二
    粉剂 mg×4 支
    -20℃保存
    每支用前甩几下使试剂落入底部，再
    加 0.3mL 的蒸馏水溶解备用。用不完
    的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻
    融，三天内用完。
    试剂三
    粉剂 mg×1 支
    -20℃保存
    临用前甩几下使粉剂落入底部，再加
    1.2mL 蒸馏水充分溶解备用。
    试剂四
    液体 30mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂五
    粉剂 mg×1 支
    -20℃保存
    临用前甩几下使粉剂落入底部，再加
    1.2mL 蒸馏水充分溶解备用。
    三、所需的仪器和用品：
    紫外分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、台式离心机、可调式移液器、研钵
    四、糖原合酶（GCS）活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    ① 组织样本：
    称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。12000rpm 4℃离心 15min，取上
    清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例提取
    ② 细胞样本：
    先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细胞加入 1mL 提取液；超声波破
    碎细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；4ºC 约 12,000rpm
    离心 10min，取上清作为待测样品。
    【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
    2、上机检测：
    ① 紫外分光光度计预热 30min 以上，设置温度 30℃，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。
    ② 试剂放在 30℃水浴 5min；
    ③ 在 1mL 玻璃比色皿中依次加入：本试剂盒仅供科研使用
    2
    试剂名称（μL）
    测定管
    样本
    40
    试剂一
    40
    试剂二
    20
    试剂三
    20
    试剂四
    600
    混匀，30℃下孵育 5min。
    试剂五
    20
    混匀，30℃下，2min 时于 340nm 处读取吸光
    值 A1，12min 时读取 A2，△A=A1-A2。
    【注】：1.若ΔA 过小，可以延长反应时间（如：22min 或更长）再读取 A2，或增加样本加样量 V1（如
    增至 80μL，则试剂四相应减小），重新调整的反应时间 T 和 V1 需代入计算公式重新计算。
    2.若 A2 值小于 0.5，则需缩短反应时间 T（如减至 7min）再读取 A2 或减少样本量 V1（如减至
    20μL，则试剂四相应增加），重新调整的反应时间 T 和 V1 需代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、按样本蛋白浓度计算
    单位定义：每毫克组织蛋白每分钟消耗 1nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
    GCS（nmol/min/mg prot）＝[ΔA÷（ε×d）×V2×109]÷(V1×Cpr) ÷T=297.4×ΔA÷Cpr
    2、按样本鲜重计算
    单位定义：每克组织每分钟消耗 1 nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
    GCS（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA÷（ε×d）×V2×109]÷(W×V1÷V)÷T=297.4×ΔA÷W
    3、按细胞密度计算
    单位定义：每 1 万个细胞每分钟消耗 1 nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
    GCS（nmol/min/104 cell）＝[ΔA÷（ε×d）×V2×109]÷(500×V1÷V)÷T=0.595×ΔA
    ε---NADH 摩尔消光系数，6.22×103 L/mol/cm；
    d---光径，1cm；
    V---加入提取液体积，1 mL；
    V1---加入样本体积，0.04mL；
    V2---反应体系总体积，7.4×10-4 L；
    T---反应时间，10 min；
    W---样本质量，g；
    500---细胞数量；
    Cpr---样本蛋白质浓度，mg/mL；建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。

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    糖原合酶（Glycogen synthase，GCS）试剂盒说明书

    214 人阅读发布时间：2023-08-16 13:44

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