淀粉去分支酶(DBE)试剂盒,微板法产品图

淀粉去分支酶(DBE)试剂盒,微板法

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  • ￥1530
  • wksubio
  • WS0450W
  • 国内
  • 2026年08月28日
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    • 库存：

      大量

    • 英文名：

      Starch Debranching Enzyme (DBE) Kit

    • CAS号：

      WS0450W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    淀粉脱分支酶（Starch debranching enzyme，DBE）试剂盒说明书
    （货号：WS0450W 微板法 48 样）
    一、产品简介：
    淀粉去分支酶(DBE)（EC 3.2.1.68）属于淀粉水解酶家族，特异性地水解支链淀粉的
    α-1，6 糖苷键，产生线性的葡萄糖链，在调整支链淀粉分子的链长方面有重要的作用。
    采用 3，5-二硝基水杨酸法测定 DBE 催化支链淀粉产生的还原糖，通过测定还原糖
    含量的变化来得到 DBE 酶活性大小。
    二、试剂盒组分与配制
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 60mL×1
    瓶
    4℃保存
    试剂一
    液体 30mL×1
    瓶
    4℃保存
    试剂二
    粉剂 mg×1 瓶
    4℃保存
    临用前甩几下，使试剂落入底部，再加
    24mL 试剂一，于 80℃水浴锅中溶解呈透
    明状态，待冷却后使用。
    试剂三
    液体 30mL×1
    瓶
    4℃保存
    试剂四
    液体 12mL×1
    瓶
    4℃保存
    标准品
    粉剂 mg×1 支
    4℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂
    三、所需的仪器和用品：
    酶标仪、96 孔板、可调式移液器、水浴锅、台式离心机、研钵、冰、蒸馏水
    四、淀粉脱分支酶（DBE）活性检测：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。12000rpm，4℃离心 10min，取
    上清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
    2、上机检测：
    1 酶标仪预热 30min 以上，调节波长到 540 nm。
    2 在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（μL）
    测定管
    对照管
    样本
    20
    20
    （95℃煮沸 10min 的酶液）
    试剂二
    200
    200
    37℃孵育 30min
    试剂三
    280
    280
    试剂四
    100
    100
    混匀，95℃显色 10min 后，流水冷却至室温后，取出 200μL 至 96
    孔板中，于 540nm 处读取吸光值 A，ΔA＝A 测定-A 对照。
    【注】若ΔA 差值较小，可加大样本量，或延长孵育时间至 1 小时或更长。本试剂盒仅供科研使用
    2
    则改变后的加样量 V1 或反应时间 T 需重新代入公式计算。
    五、结果计算：
    1、标准曲线：y = 2.5359x - 0.0196，x 是标准品质量（mg），y 是ΔA。
    2、按照蛋白浓度计算
    酶活定义：每毫克组织蛋白每小时水解支链淀粉产生 1mg 还原糖（以麦芽糖计）定义为
    一个酶活力单位。
    DBE 活力(mg/h/mg prot)=[ (ΔA+0.0196)÷2.5359]÷(V1×Cpr)÷T
    =39.43× (ΔA+0.0196) ÷Cpr
    3、按样本鲜重计算
    酶活定义：每克组织每小时水解支链淀粉产生 1mg 还原糖（以麦芽糖计）定义为一个酶
    活力单位。
    DBE 活力(mg /h/g 鲜重)=[ (ΔA+0.0196)÷2.5359]÷(W×V1÷V)÷T
    =39.43× (ΔA+0.0196) ÷W
    V----加入提取液体积，1 mL；
    V1----反应中样品体积，20μL=0.02mL；
    W----样品质量，g；
    T----反应时间，30min=0.5h；
    Cpr---样本蛋白质浓度，mg/mL，建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒；
    附：标准曲线制作过程：
    1 制备标准品母液（50mg/mL）：临用前加 1mL 蒸馏水，充分溶解混匀。
    2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0,5,10,15,20, 25mg/mL。也可根据实际样本来
    调整标准品浓度。
    3 按照测定管加样体系操作，依据结果即可制作标准曲线。

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