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土壤过氧化氢酶(S-CAT)试剂盒-可见显色法

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  • ￥480 - 810
  • wksubio
  • WS3030F
  • 国内
  • 2025年07月20日
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    • 英文名：

      Soil Catalase (S-CAT) Reagent Kit - Visible Color Method

    • CAS号：

      WS3030F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      24T/48T

    规格：24T产品价格：￥480.0
    规格：48T产品价格：￥810.0
    本试剂盒仅供科研使用
    土壤过氧化氢酶（Solid-Catalase，S-CAT）试剂盒说明书
    (货号：WS3030F 分光法 48 样)
    一、产品简介：
    土壤过氧化氢酶主要分解土壤中的过氧化氢，降低土壤中过度累积的过氧化氢对植
    物根系的危害。本试剂盒提供一种简单，灵敏，快速的测定方法，即 CAT 催化过氧化
    氢产生水与氧气，剩余的过氧化氢与一种高灵敏显色探针反应生成有色物质，其在
    510nm 左右有最大吸收峰。通过过氧化氢的减少量来计算土壤中 CAT 酶的活力。
    本试剂盒突出特点是从紫外波长（240nm：过氧化氢的检测波长）转换到可见波长
    （510nm）检测，无需使用石英比色皿或 UV 板。而且由于过氧化氢极其不稳定，直接
    检测造成读值不稳定，且蛋白质等组分在此紫外波长下也有光吸收，影响结果精确性。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格试剂名称 保存要求
    备注
    试剂一
    液体×1 支
    4℃保存
    用前甩几下或者离心使试剂落入底
    部，分别取出 15μL 至四个新的 EP 管
    中，再加 1.5mL 蒸馏水充分溶解备用。
    试剂二
    液体 12mL×1 支
    室温
    试剂三
    液体 100mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂四
    液体 16mL×1 瓶
    4℃保存
    标准品
    液体 1mL×1 支
    4℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂。
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、
    蒸馏水。
    四、土壤过氧化氢酶（Solid-Catalase，S-CAT）活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干，先粗研磨，过 40 目筛网，备用。
    【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
    2、上机检测：
    ① 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 510nm，蒸馏水调零。
    ② 试剂一事先按照试剂配制要求配制好，再进行以下操作。
    [建议]：若一次性样本较多，离心数量有限，可分批操作，待一批样本加完试剂二开始离心时，再
    进行下一批操作（土壤样本可一次性称完，分批按照加样表操作）。
    ③ 在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（µL）
    测定管
    无基质管
    无土管
    （仅做一次）
    土样（
    g）
    0.1
    0.1
    蒸馏水
    800
    800
    800
    室温（25℃）震荡（如：摇床）培养 30min，
    试剂一
    100
    0
    100本试剂盒仅供科研使用
    2
    ④ 显色反应：在 EP 管中依次加入：
    【注】：1. 无土管的颜色最深，若测定管颜色很浅接近无色，说明样本里面过氧化氢酶含量很高，则反应
    10min 的时间缩短（如 5min）或减少土壤取样质量 W。则改变后的 T 和 W 重新代入公式计算。
    2. 若一次性检测样本较多，在显色反应阶段可酌情分批操作和读值，为保证数据的精确性，显色
    反应阶段最好半个小时内完成。
    五、结果计算：
    1、标准曲线：y = 0.1677x - 0.0457；x 为标准品摩尔质量（µmol），y 为ΔA。
    2、单位定义：每小时每克土样催化 1µmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
    S-CAT(µmol/h/g 土样)=[(△A+0.0457)÷0.1677]÷W÷T=35.8×(△A+0.0457)÷W
    T---反应时间，10 min=1/6h；
    W---土壤样本实际取样量，g。
    附：标准曲线制作过程：
    1 把标准品（100µmol/mL）稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 20, 40, 60, 80, 100.
    µmol/mL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
    2 按照无土管加样顺序（100µL 试剂一换成 100µL 标准品，其他不变）依次加入试剂
    测定，标准品的摩尔质量作为横坐标，吸光值作为纵坐标，即得标准曲线。
    蒸馏水
    0
    100
    混匀，室温（25℃）10min（务必每隔 2min 摇晃一次）。
    试剂二
    100
    100
    100
    12000rpm，4℃或室温离心 10min，上清液务必全部转移至新的 EP
    管中，待测。
    上清液
    25
    25
    25
    试剂三
    825
    825
    825
    试剂四
    150
    150
    150
    室温（25℃）静置 3min，全部转移到 1mL 的玻璃比色皿（光径 1cm）
    中，务必立即在 510nm 下读取吸光值 A，△A=A 无土管-(A 测定管-A
    无基质管)。

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