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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Soil Lignin Peroxidase (S-Lip) Kit
- CAS号:
WS1330F
- 保质期:
3个月
- 供应商:
上海瓦兰生物
- 保存条件:
4℃
- 规格:
24T
本试剂盒仅供科研使用
土壤木质素过氧化物酶(Soil lignin peroxidase,S-Lip)试剂盒说明书
(货号:WS1330F 紫外分光法 24 样)
一、产品简介:
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解
酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制
等方面具有较大的应用潜力。
土壤木质素过氧化物酶(S-LiP)氧化藜芦醇生成藜芦醛,藜芦醛在 310nm 处有特征吸
收峰。通过测定 310nm 处的藜芦醛的增加速率,即可得到 S-LiP 酶活性大小。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体μL×1 瓶
4℃保存
临用前用前甩几下使液体落入底部,
再加 8.73mL 蒸馏水混匀备用。
试剂三
液体μL×1 支
4℃保存
临用前用前甩几下使液体落入底部,
取 2 个新的 EP 管,每管取 3.3μL 液
体,再加 2mL 蒸馏水混匀备用。
三、所需的仪器和用品:
紫外分光光度计、1mL 石英比色皿(光径 1cm)、天平、低温离心机、天平、空气浴
/恒温震荡培养箱、甲苯。
四、土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样
本和试剂浪费!
1、样本制备:
取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干,先粗研磨,过 40 目筛,再次研磨过 60 目筛网,
备用。
【注】:土壤风干,减少土壤中水分对于实验的干扰;土壤过粗细两次筛,保证取样的均匀细腻;
2、上机检测:
1 紫外分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 310nm,蒸馏水调零。
2 所有试剂至常温(25℃)状态。
3 在 EP 管中依次加入:
试剂名称(
μL)
测定管
对照管
土样(
g)
0.1
0.1
甲苯
30
30
25℃静置 15min
试剂一
570
蒸馏水
570
试剂二
120
120
试剂三
80
80
30℃震荡(空气浴)反应 3h,12000rpm,4℃离心 10min,取全
部上清液移至 1mL 石英比色皿中,于 310nm 处读取吸光值 A,
△A=A 测定- A 对照(每个样本做一个自身对照)。
【注】若△A 值较低,可加大土壤样本量 W 或者延长反应时间 T,则改变后的本试剂盒仅供科研使用
2
样本质量 W 和反应时间 T 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算:
酶活性定义:每克土壤每天氧化 1nmol 藜芦醇生成藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP 活性(nmol/d /g 土样)= (△A÷ε÷d) ×109× V÷W÷T= 688.2×△A÷W
ε---藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;
d---比色皿光径,1cm;
V---反应总体积,0.8mL=0.8×10-3L;
W---样本质量,g;
T---反应时间,3h=1/8d。
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土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)试剂盒
¥560










