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土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)试剂盒,微板法

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  • WS1330W
  • 国内
  • 2025年08月12日
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    • 英文名

      Soil Lignin Peroxidase (S-Lip) Kit

    • CAS号

      WS1330W

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    土壤木质素过氧化物酶(Soil lignin peroxidaseS-Lip)试剂盒说明书
    (货号:WS1330W 微板法 48 样)
    一、产品简介:
    木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解
    酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制
    等方面具有较大的应用潜力。
    土壤木质素过氧化物酶(S-LiP)氧化藜芦醇生成藜芦醛,藜芦醛在 310nm 处有特征吸
    收峰。通过测定 310nm 处的藜芦醛的增加速率,即可得到 S-LiP 酶活性大小。
    二、试剂盒组分与配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    液体 10mL×1
    4℃保存
    试剂二
    液体μL×1
    4℃保存
    临用前用前甩几下使液体落入底部,再
    8.73mL 蒸馏水混匀备用。
    试剂三
    液体μL×1
    4℃保存
    临用前用前甩几下使液体落入底部,取
    2 个新的 EP 管,每管取 3.3μL 液体,再
    2mL 蒸馏水混匀备用。
    三、所需的仪器和用品:
    酶标仪、96 孔板(UV 板)、天平、低温离心机、天平、空气浴/恒温震荡培养箱、甲苯
    四、土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)活性测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本制备:
    取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干,先粗研磨,过 40 目筛备用。
    【注】:土壤风干,减少土壤中水分对于实验的干扰;土壤过筛,保证取样的均匀细腻;
    2、上机检测:
    1 酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 310nm
    2 所有试剂至常温(25℃)状态。
    3 EP 管中依次加入:
    试剂名称(
    μL
    测定管
    对照管
    土样(
    g
    0.1
    0.1
    甲苯
    30
    30
    25℃静置 15min
    试剂一
    200
    蒸馏水
    200
    试剂二
    60
    60
    试剂三
    40
    40
    30℃震荡(空气浴)反应 3h12000rpm4℃离心 10min,取上清
    200μL 移至 96 孔板中,于 310nm 处读取吸光值 AA=A 测定- A
    对照(每个样本做一个自身对照)。
    【注】若A 值较低,可加大土壤样本量或者延长反应时间,则改变后的样本质量 W 和反应时间 T
    需代入计算公式重新计算。本试剂盒仅供科研使用
    2
    五、结果计算:
    酶活性定义:每克土壤每天氧化 1nmol 藜芦醇生成藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。
    S-LiP 活性(nmol/d /g 土样)=(A÷ε÷d)×109×V÷W÷T=567.7×A÷W
    ε---藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm
    d---比色皿光径,0.5cm
    V---反应总体积,0.33mL=0.33×10-3L
    W---样本质量,g
    T---反应时间,3h=1/8d

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