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- 中科百抗
- BM350101
- 中国
- 2026年01月12日
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大量
- 英文名：
PEI Transfection
- 保质期：
6个月
- 供应商：
深圳中科百抗生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
1mL
产品信息
产品实验流程
| 以HEK293细胞为例： 1.转染前，确保细胞存活率大于95%，活细胞密度在(1.5~2.0)×106 cells/mL之间； 2.将活细胞密度稀释至1.05×106 cells/mL； 3.将pDNA和1 mg/mL Bestop™PEI线性转染试剂颠倒数次，混匀； 4.每毫升待转染培养物转1 μg pDNA到一个干净的小瓶中。用新鲜培养基稀释至20 μg/mL（5%最终培养体积）。 5.每毫升待转染培养物转3 μL 1 mg/mL Bestop™PEI线性转染试剂至干净的小瓶中。用培养基稀释至60 μg/mL(5%最终培养体积)。 6.将稀释的pDNA和Bestop™PEI线性转染试剂混合。颠倒几次，在室温下静置10分钟。使用前将密封的容器轻轻颠倒一次。 7.每90 mL培养基转染10 mL pDNA/PEI混合物。在混合的同时逐渐将混合物加入到培养基中，孵育细胞。 8.转染后：如果使用增强剂或补充剂，可以在转染后6小时的任何时间添加。传代培养也可以在6小时后进行。 如果使用GFP对照，48小时后应观察到转染率超过70%。对于优化过的方法，80%以上的转染率是合理的。 ·特别提醒：初次使用PEI进行转染时，请先优化出适合自己实验的最佳DNA和PEI比例。 |
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文献和实验【原创】采用GenEscort™ 转染试剂实施RNA干扰（RNAi）实验进行肿瘤的基因治疗研究
新的策略。 本实验的GenEscort™ Ⅲ基因转染试剂发挥了重要的工具作用，这种非病毒载体相对于病毒载体有许多优点，因而被广泛使用，近年来对 PEI 的改性，已成为研究的热点，以便使其有更好的转染效率和更小的毒性。GenEscort™ Ⅲ是一种多用途的转染试剂，该试剂由可生物降解的超高分枝的PEI衍生物与其它组分复合而成。对各种贴壁细胞有较高的转染效率、也适用于转染悬浮细胞和原代细胞。可用于转染大分子DNA、小分子寡核苷酸和siRNA等。特别适用于携带质粒或DNA、RNA片段用于注射
融合，也有自身环形形式存在的。与基因组融合后的质粒可以在细胞分裂的时候带给子细胞，所以可以用来筛选稳定细胞株。而有的质粒则在传代过程中丢失。每个转染细胞内的质粒数量就很难说了，看转染效率吧。从概率来说，当然是数量越多，蛋白表达会高一点，当然也不是绝对的。最常用的转染试剂包括磷酸钙、PEI、lipofectamine等等，还有各个生物公司有自己的试剂，质量应该也都不错。 bioenw 质粒转染的效率不如病毒转染的效率高，像慢病毒，可以稳定整合到基因组，子代也不会丢失
的交联剂交联，合成出的一系列高分枝的可降解的PEI衍生物。聚合物的分枝结构使得其具有较高的正电性，因此易于高效地包裹各种DNA 、RNA 分子及质粒形成小的纳米颗粒，从而提高转染效率，当所形成复合物进入细胞以后，其中所含的生理条件下可降解的化学键在细胞内水解，使交联聚合物分解为无细胞毒性的小分子PEI ，这样结构的转染试剂在体外应用可以获得高的转染效率和低的细胞毒性，其可降解性对体内应用也具有重要的意义。
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