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- 免疫印迹是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。
- 浙江省
- 2025年12月03日
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嘉兴硕玺生物有限公司
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WB（蛋白质免疫印迹）
免疫印迹（WB）
免疫印迹是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。
实验意义
WB用于鉴定能够被特异性抗体识别的大分子抗原（通常是蛋白质），并测定抗原的分子量。
实验步骤 
结果展示： 
实验完成周期及交付标准
- 实验周期：
1-2周
- 交付标准：黑白显色图、内参、灰度值分析、柱状图、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
需确认的信息
- 样本种属及类型，是组织还是细胞？
- 需要检测目标蛋白。
- 检测分样本数及分组，每张膜的上样顺序？
- 是否购买一抗，本公司可代购。
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文献和实验蛋白质免疫印迹蛋白质免疫印迹（Western Blot，简称 WB）可以：1. 从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；2. 定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；3. 用于蛋白质 - 蛋白质、蛋白质 - DNA、蛋白质 - RNA 相互作用后续分析。实验原理WB 是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与 Southern 或 Northern 杂交方法类似，但 WB 采用的是聚丙
蛋白电泳：电泳胶的制备、配方、缓冲液配方，请参考分子克隆。经验之谈，8%胶最底边约36KDa，10%最底边约25KDa，12%最底部约12KDa。8%胶可以跑300KDa-36KDa之间的任意蛋白，转膜效率对WB结果的的影响都问题不大。12%，180KDa左右，转膜效率对WB结果的影响都问题不大（300KDa蛋白如何，没有尝试过）。电泳一般采用恒流，45mA-55mA（应根据电泳仪器适当调整，要注意仪器最高限压；此条件适合gibcomodelV16型，胶宽20cm）。采用恒流的优点，保证最快
