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- 蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB ）
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- 2026年01月04日
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晶莱生物
- 服务名称：
蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB ）
- 规格：
实验服务
免疫印迹（WB）
蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot，简称WB。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色，通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
实验意义
获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。
实验原理：
Western Blot采用的是聚丙**胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
实验原理：
Western Blot采用的是聚丙**胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
实验步骤
结果展示：
实验完成周期及交付标准
1. 实验周期：1-2周
2. 交付标准：黑白显色图、内参、灰度值分析、柱状图、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
需确认的信息
1. 样本种属及类型，是组织还是细胞？
2. 需要检测目标蛋白。
3. 检测分样本数及分组，每张膜的上样顺序？
4. 是否购买一抗，本公司可代购。
收费标准/服务周期/提供结果：
欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
更多实验技术服务请浏览网站其他内容，或来电咨询！
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【长沙公司】长沙市高新区麓谷大道627号新长海中心A1-1203室
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文献和实验相关实验
蛋白质免疫印迹蛋白质免疫印迹（Western Blot，简称 WB）可以：1. 从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；2. 定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；3. 用于蛋白质 - 蛋白质、蛋白质 - DNA、蛋白质 - RNA 相互作用后续分析。实验原理WB 是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与 Southern 或 Northern 杂交方法类似，但 WB 采用的是聚丙
蛋白电泳：电泳胶的制备、配方、缓冲液配方，请参考分子克隆。经验之谈，8%胶最底边约36KDa，10%最底边约25KDa，12%最底部约12KDa。8%胶可以跑300KDa-36KDa之间的任意蛋白，转膜效率对WB结果的的影响都问题不大。12%，180KDa左右，转膜效率对WB结果的影响都问题不大（300KDa蛋白如何，没有尝试过）。电泳一般采用恒流，45mA-55mA（应根据电泳仪器适当调整，要注意仪器最高限压；此条件适合gibcomodelV16型，胶宽20cm）。采用恒流的优点，保证最快
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WB（蛋白质免疫印迹）
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