蛋白质组学鉴定项目

1. 样品前处理
蛋白酶解
从各个样本中分别取适量蛋白转移至新的 EP 管中，用 8 M urea 调至 100 μL 定容。加入 2 μL 0.5 M TCEP 于 37℃下反应 1 小时，随后加入 4 uL 1 M 碘yi酰胺，室温下避光反应 40 min。然后，按样品：bing酮（体积比）为 1:5 加入-20℃预冷bing酮，并于-20℃下过夜沉淀。随后高速离心（12000 g, 20 min, 4℃）弃去上清。加入 1 mL -20℃预冷的 90%bing酮溶液，涡旋混匀清洗样品后，再次高速离心（12000 g, 20 min, 4℃）弃上清。清洗步骤重复两次。室温干燥至沉淀表面的bing酮完全挥干后，将其重溶于 100 μL 100 mM TEAB，按酶：蛋白（质量比）为 1：50 加入 trypsin（Promega, Madison, WI），37℃过夜酶解。采用 C18 除盐柱除盐后冻干。

2. 仪器参数设置

3. 数据分析部分

4. 结果简要总结
4.1 鉴定蛋白列表
4.2 结果查看说明

5. 实验仪器及试剂
5.1 实验仪器
5.2 试剂耗材