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嘉兴硕玺生物有限公司
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蛋白质组学鉴定项目
1. 样品前处理
蛋白酶解
从各个样本中分别取适量蛋白转移至新的 EP 管中,用 8 M urea 调至 100 μL 定容。加入 2 μL 0.5 M TCEP 于 37℃下反应 1 小时,随后加入 4 uL 1 M 碘yi酰胺,室温下避光反应 40 min。然后,按样品:bing酮(体积比)为 1:5 加入-20℃预冷bing酮,并于-20℃下过夜沉淀。随后高速离心(12000 g, 20 min, 4℃)弃去上清。加入 1 mL -20℃预冷的 90%bing酮溶液,涡旋混匀清洗样品后,再次高速离心(12000 g, 20 min, 4℃)弃上清。清洗步骤重复两次。室温干燥至沉淀表面的bing酮完全挥干后,将其重溶于 100 μL 100 mM TEAB,按酶:蛋白(质量比)为 1:50 加入 trypsin(Promega, Madison, WI),37℃过夜酶解。采用 C18 除盐柱除盐后冻干。
2. 仪器参数设置
3. 数据分析部分
4. 结果简要总结
4.1 鉴定蛋白列表
4.2 结果查看说明
5. 实验仪器及试剂
5.1 实验仪器
5.2 试剂耗材 

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